Anticorps monoclonal de lapin anti-pan 14-3-3 pour WB, IF/ICC, ELISA - P27348 / P31946 / P61981 / P62258 / P63104 / Q04917 / P31947

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la pan 14-3-3

• La famille des protéines 14-3-3 chez l'homme se compose de sept isoformes — bêta, gamma, epsilon, êta, sigma, thêta et zêta — codées respectivement par les gènes YWHAB, YWHAG, YWHAE, YWHAH, SFN, YWHAQ et YWHAZ, et sont reconnues par cet anticorps pan-spécifique.
• Ces protéines adaptatrices se lient aux motifs phosphosérine/phosphothréonine sur un large éventail de molécules de signalisation, modulant ainsi les activités kinases (par exemple, régulation négative de PDPK1), l'apoptose et les voies métaboliques.
• L'isoforme thêta (P27348), également connue sous le nom de protéine 14-3-3 tau ou HS1, est abondamment exprimée dans le cerveau, le cœur et le pancréas, avec des niveaux plus faibles dans les reins et le placenta ; son expression est régulée à la hausse dans la sclérose latérale amyotrophique (SLA) de la moelle épinière.
• Les protéines 14-3-3 se localisent principalement dans le cytoplasme, ce qui concorde avec leur rôle dans la transduction des signaux de la membrane cellulaire vers les effecteurs intracellulaires.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination (formation de liaisons isopeptidiques), sont essentielles pour réguler la dimérisation, la stabilité et l'interaction des 14-3-3 avec leurs partenaires.
• Mots-clés issus de bases de données conservées : structure 3D, acétylation, cytoplasme, séquençage direct des protéines, liaison isopeptidique, nitration, phosphoprotéine, identification protéomique, protéome de référence, conjugaison Ubl.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale hautement conservée de la 14-3-3 thêta (NP_006817.1, acides aminés 1-100), garantissant une large reconnaissance des sept isoformes humaines ; la réactivité inter-espèces chez la souris et le rat a été confirmée.
• Pour le Western blot, plusieurs bandes entre 27 et 29 kDa sont attendues en raison de la diversité des isoformes ; incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, lysats de cellules HeLa, HEK293 ou de tissu cérébral) et validez les profils de bandes avec les profils d'expression connus.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), une perméabilisation est nécessaire car la cible est cytoplasmique ; attendez-vous à une coloration diffuse, qui peut s'intensifier ou se relocaliser en réponse à des stimuli spécifiques.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection, mais la concentration de revêtement optimale et les conditions de dosage doivent être déterminées empiriquement.

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