Anticorps polyclonal de lapin anti-PAK3 pour WB, IF/ICC, ELISA - O75914

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PAK3

• PAK3 (kinase sérine/thréonine-protéine PAK 3) est un membre de la famille des kinases activées par p21 (PAK) et est principalement exprimée dans les neurones postmitotiques du cortex cérébral et de l’hippocampe (UniProt O75914, SPÉCIFICITÉ TISSULAIRE).
• Elle fonctionne comme un effecteur en aval des petites GTPases CDC42 et RAC1, et joue un rôle clé dans la régulation du cytosquelette, la migration cellulaire et la régulation du cycle cellulaire (FONCTION).
• PAK3 est essentielle à la morphogenèse des épines dendritiques, à la formation des synapses et à la plasticité synaptique ; dans les neurones hippocampiques, elle est nécessaire à la formation des épines dendritiques et des synapses excitatrices (FONCTION, SPÉCIFICITÉ TISSULAIRE).
• Lorsqu’elle est activée par CDC42/RAC1, PAK3 subit un changement conformationnel et une autophosphorylation sur des résidus sérine/thréonine, puis phosphoryle des cibles telles que MAPK4, MAPK6, MAPKAPK5 et TNNI3/la troponine I afin de réguler la polymérisation de l’actine et la sensibilité au calcium (FONCTION).
• Ses substrats supplémentaires comprennent la chaîne légère régulatrice de la myosine II (MLC), reliant l’activité kinase de PAK3 à la contractilité actomyosine dans les épines dendritiques (FONCTION, par similarité).
• La protéine se localise dans le cytoplasme (LOCALISATION SUBCELLULAIRE) et contient un domaine de liaison à SH3 ainsi qu’un domaine de type ubiquitine (MOTS-CLÉS : liaison à SH3, conjugaison Ubl).
• PAK3 est associée à une déficience intellectuelle liée à l’X (MRX30, MRX47, XLID30), et des formes variantes sont associées à la maladie (MOTS-CLÉS : variant pathologique, déficience intellectuelle).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’anticorps a été produit contre un peptide synthétique provenant de la région N-terminale (aa 1-100) de la PAK3 humaine (isoforme NP_001121638.1). Cette région peut être présente dans plusieurs isoformes ; la spécificité doit être vérifiée à l’aide de contrôles spécifiques des isoformes.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire attendu de la PAK3 complète est d’environ 62 kDa ; préparer des lysats à partir de lignées cellulaires neuronales ou de tissus cérébraux pertinents, et inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En immunofluorescence (IF/ICC), envisager de tester plusieurs protocoles de fixation/per making? afin d’optimiser la détection de la PAK3 endogène, qui est cytoplasmique.
• Les applications ELISA peuvent être utilisées pour titrer l’anticorps à l’aide du peptide immunisant ou d’une protéine recombinante ; une réactivité croisée avec les protéines de souris et de rat a été rapportée, mais une validation dans le système d’essai spécifique est recommandée.
• Comme il s’agit d’un anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots peut varier ; il est conseillé d’effectuer des tests préliminaires avec votre configuration expérimentale.

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