Anticorps monoclonal de lapin anti-PAF1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q8N7H5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PAF1

• Composant central du complexe PAF1 (PAF1C), qui régule l'élongation de la transcription par l'ARN polymérase II, les modifications des histones et la formation de l'extrémité 3' de l'ARNm.
• Le PAF1C s'associe au domaine C-terminal de l'ARN polymérase II dans ses états non phosphorylé et phosphorylé, facilitant le couplage entre la transcription et les processus co-transcriptionnels.
• Il favorise la monoubiquitination de l'histone H2B sur la lysine 120 (H2BK120ub1) via le recrutement du complexe ubiquitine ligase RNF20/40, et stimule la méthylation H3K4me3 ; ces modifications sont essentielles pour une transcription active.
• Il est requis pour la transcription des gènes cibles de Hox et Wnt, et joue un rôle dans l'hématopoïèse et la leucémogenèse par interaction avec les oncoprotéines de fusion KMT2A/MLL1.
• Il est localisé dans le noyau, ce qui est cohérent avec ses fonctions de régulation transcriptionnelle.
• Il présente une activité oncogénique ; il est impliqué dans les voies de l'épissage alternatif, de la phosphorylation et de la conjugaison de l'ubiquitine.
• Pendant l'infection par la grippe A (H3N2), il interagit avec la protéine virale NS1 pour moduler la transcription des gènes de l'hôte.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique de la région N-terminale (aa 1-100) de la protéine PAF1 humaine. L'anticorps peut donc détecter la forme pleine longueur et certains isoformes. Vérifiez la spécificité vis-à-vis des isoformes dans votre système expérimental.
• Pour le Western blot, attendez une bande proche de 60 kDa dans des conditions réductrices ; utilisez des contrôles positifs comme des lysats de cellules HeLa ou HEK293.
• La coloration IHC-P doit montrer une localisation nucléaire ; optimisez la récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps à l'aide de contrôles tissulaires positifs appropriés.
• En ELISA, le peptide immunogène peut servir d'étalon. La réactivité croisée avec PAF1 de souris et de rat permet son utilisation chez ces espèces ; confirmez les performances sur les échantillons de l'espèce étudiée.
• Envisagez des essais de co-immunoprécipitation ou de ChIP si l'anticorps est adapté à l'analyse de complexes protéiques natifs, mais validez ces applications indépendamment.

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