Anticorps polyclonal de lapin anti-PADI4 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9UM07

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PADI4

• PADI4 (peptidyl-arginine désiminase de type 4) est une hydrolase dépendante du calcium qui catalyse la citrullination (désimination) des résidus d’arginine dans les protéines cibles, jouant un rôle clé dans les modifications post-traductionnelles et la régulation de la chromatine.
• Elle citrulline les histones : H1 en Arg-54 (H1R54ci), H3 en Arg-2/8/17/26 (H3R2ci, H3R8ci, H3R17ci, H3R26ci) et H4 en Arg-3 (H4R3ci), modulant ainsi la dynamique des nucléosomes et l’expression des gènes.
  Références associées : PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635
• Dans les cellules souches, la citrullination de H1R54ci induite par PADI4 déplace l’histone H1 de la chromatine, provoquant une décondensation globale de la chromatine et favorisant le maintien de la pluripotence.
  Références associées : PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635
• Au cours des réponses immunitaires innées des neutrophiles, PADI4 induit une décondensation profonde de la chromatine et est essentielle à la formation des pièges extracellulaires des neutrophiles (NET), qui capturent et éliminent les agents pathogènes.
  Références associées : PMID:18209087 PMID:19153223 PMID:25622091 PMID:28574339
• La citrullination de l’histone H3 par PADI4 empêche sa méthylation par les arginine méthyltransférases CARM1 et PRMT1, ce qui entraîne une répression transcriptionnelle.
  Références associées : PMID:15345777
• Au-delà des histones, PADI4 citrulline également des substrats non histoniques tels que l’acétyltransférase EP300 (p300) en Arg-2142, ce qui renforce son interaction avec le coactivateur NCOA2.
  Références associées : PMID:15731352
• PADI4 se localise dans le cytoplasme, le noyau et les granules cytoplasmiques, ce qui concorde avec ses rôles dans les processus cytosoliques et nucléaires.
• Son expression est principalement limitée aux éosinophiles et aux neutrophiles ; elle n’est pas détectée dans les monocytes ou les lymphocytes périphériques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 290–663, englobant le domaine catalytique C-terminal ; l’anticorps devrait détecter la PADI4 pleine longueur.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est de 74 kDa ; il est recommandé d’utiliser des lignées cellulaires de neutrophiles (par ex. HL-60) ou des granulocytes primaires comme témoins positifs.
• En immunofluorescence (IF/ICC), un profil de marquage cytoplasmique, nucléaire et granulaire est attendu ; les protocoles de perméabilisation et de fixation peuvent nécessiter une optimisation.
• Pour les applications ELISA, validez la paire d’anticorps avec la protéine PADI4 recombinante ou des lysats cellulaires afin de déterminer les conditions optimales de revêtement et de détection.

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