Anticorps polyclonal anti-PADI4 pour WB, IHC-P, ELISA - Q9UM07

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la PADI4

• La PADI4 catalyse la citrullination (désimination) des résidus d’arginine sur les histones H1, H3 et H4, jouant un rôle clé dans le code des histones et la régulation du maintien des cellules souches. Elle modifie spécifiquement H1 en Arg-54, H3 en Arg-2, Arg-8, Arg-17 et/ou Arg-26, et H4 en Arg-3. Références associées : PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635
• La citrullination de l’histone H3 par la PADI4 empêche sa méthylation par CARM1 et HRMT1L2/PRMT1, entraînant une répression transcriptionnelle. Références associées : PMID:15345777
• La citrullination de H1 en Arg-54 (H1R54ci) médiée par la PADI4 provoque le déplacement de H1 de la chromatine, entraînant une décondensation globale de la chromatine. Ce processus favorise la pluripotence et est essentiel lors de la réponse immunitaire innée des neutrophiles. Références associées : PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635 PMID:18209087
• Elle est essentielle à la formation des pièges extracellulaires des neutrophiles (NET) en favorisant la citrullination de l’histone H3, la décondensation de la chromatine et la rupture de la membrane nucléaire. Références associées : PMID:19153223 PMID:25622091 PMID:28574339
• La PADI4 citrulline également EP300/p300 en Arg-2142, ce qui renforce son interaction avec NCOA2/GRIP1. Références associées : PMID:15731352
• Au niveau subcellulaire, la PADI4 se localise dans le cytoplasme, le noyau et les granules cytoplasmiques.
• Spécificité tissulaire : elle est exprimée dans les éosinophiles et les neutrophiles, mais pas dans les monocytes périphériques ni les lymphocytes.
• Les mots-clés soulignent ses rôles d’hydrolase liant le calcium et les métaux, de régulateur de la chromatine, ainsi que son implication dans l’immunité innée et la régulation transcriptionnelle.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 290–663, couvrant une large région C-terminale. L’anticorps polyclonal obtenu devrait reconnaître plusieurs épitopes, offrant potentiellement un signal robuste dans différentes applications.
• En WB, une bande d’environ 74 kDa est attendue. Validez le résultat avec un contrôle positif approprié, tel que des lysats de neutrophiles ou de cellules souches.
• Pour l’IHC-P, envisagez d’utiliser des coupes de tissus humains, murins ou de rat. Une coloration intense est attendue dans les éosinophiles et les neutrophiles ; optimisez la récupération antigénique et la dilution de l’anticorps.
• En ELISA, utilisez la protéine PADI4 recombinante ou purifiée pour évaluer la réactivité. Titrer l’anticorps et les réactifs de détection afin d’établir une concentration de travail appropriée.

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