Anticorps monoclonal de lapin anti-P4HB pour WB, IHC-P, ELISA - P07237

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de P4HB

• La protéine disulfure-isomérase (P4HB) est une enzyme et chaperonne multifonctionnelle du réticulum endoplasmique, également connue sous les noms PDI, PDIA1 et sous-unité bêta de la prolyl 4-hydroxylase.
• Elle catalyse la formation, la rupture et le réarrangement des ponts disulfure dans les protéines naissantes, assurant un repliement correct des protéines dans la lumière du réticulum endoplasmique.
• À la surface cellulaire, elle agit comme une réductase qui clive les ponts disulfure des protéines exofaciales, modulant ainsi la structure et la fonction des protéines de surface cellulaire. Références associées : PMID:21670307
• Lorsqu'elle est phosphorylée par FAM20C, à fortes concentrations, P4HB fonctionne comme une chaperonne inhibant l'agrégation des protéines mal repliées, tandis qu'à faibles concentrations, elle favorise l'agrégation (activité anti-chaperonne). Références associées : PMID:32149426
• Elle sert de sous-unité structurelle du complexe prolyl 4-hydroxylase et de la protéine de transfert des triacylglycérols microsomique MTTP.
• La localisation subcellulaire comprend la lumière du réticulum endoplasmique, les mélanosomes et la membrane cellulaire ; elle est également sécrétée à la surface cellulaire où elle interagit avec LGALS9.
• Mots-clés et associations avec des maladies : les mutations de P4HB sont liées à la craniosynostose et à l'ostéogenèse imparfaite ; les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide C-terminal (aa 409-508) de la protéine P4HB humaine ; l'accessibilité de l'épitope peut être influencée par le repliement de la protéine ou des interactions.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 57 kDa est attendue. Utilisez des contrôles de charge appropriés et validez la spécificité de l'anticorps à l'aide d'échantillons de knockdown ou knockout.
• En immunohistochimie (IHC-P), les méthodes de démasquage antigénique (par exemple, démasquage induit par la chaleur dans un tampon citrate, pH 6.0) peuvent améliorer le signal. Optimisez la concentration de l'anticorps primaire et les conditions d'incubation.
• Pour l'ELISA, envisagez d'apparier cet anticorps monoclonal avec un anticorps de capture ou de détection polyclonal pour les tests en sandwich ; validez dans la matrice d'échantillon pertinente.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; cependant, vérifiez l'homologie de séquence de la région immunogène entre les espèces pour confirmer la liaison si vous utilisez des échantillons non humains.
• Conservez l'anticorps comme recommandé (l'expédition en sac de glace indique une exigence de chaîne du froid) ; évitez les cycles répétés de congélation-décongélation.

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