Anticorps polyclonal de lapin anti-P4HA3 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z4N8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de P4HA3

• P4HA3 (sous-unité alpha-3 de la prolyl 4-hydroxylase) est une enzyme cruciale pour la biosynthèse du collagène, catalysant la formation de 4-hydroxyproline dans les motifs -Xaa-Pro-Gly-.
• Cette modification post-traductionnelle est essentielle pour la stabilité thermique de l'hélice triple du collagène et l'assemblage correct de la matrice extracellulaire.
• Plusieurs isoformes sont générées par épissage alternatif, et la protéine présente un peptide signal, des répétitions tétra-tricopeptidiques (TPR) et un domaine en coiled-coil.
• Localisée principalement dans la lumière du réticulum endoplasmique, où se produit le traitement du collagène.
• Hautement exprimée dans le placenta, le foie et la peau fœtale ; également détectée dans les chapeaux fibreux des lésions athérosclérotiques et à des niveaux plus bas dans d'autres tissus.
• Appartient à la famille des dioxygénases dépendantes du 2-oxoglutarate et du fer P4HA ; nécessite de la vitamine C pour son activité.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, et la protéine est connue pour lier le fer comme cofacteur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 20–110) cible la région N-terminale ; effectuez un alignement de séquences pour prédire la réactivité croisée dans d'autres espèces.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 61 kDa ; validez en utilisant des lysats témoins positifs de placenta ou de foie.
• Pour l'IF/ICC, optimisez les conditions de perméabilisation pour détecter la protéine résidant dans la lumière du RE.
• L'ELISA peut nécessiter un titrage à la fois de l'antigène de revêtement et de l'anticorps pour obtenir un signal optimal.

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