Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-P4HA2 pour WB, IF/ICC, ELISA - O15460

Spécifications des Produits et Paramètres Principaux

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du P4HA2

• La sous-unité alpha-2 de la prolyl 4-hydroxylase (P4HA2) est une enzyme clé de la biosynthèse du collagène, catalysant l'hydroxylation des résidus de proline dans les séquences -Xaa-Pro-Gly- pour former la 4-hydroxyproline, ce qui est essentiel pour la stabilité et la fonction de l'hélice triple du collagène.
• Le P4HA2 est l'une des plusieurs isoformes de sous-unités alpha qui forment des complexes hétérotétramériques avec P4HB (sous-unité bêta) pour constituer la prolyl 4-hydroxylase active ; l'épissage alternatif produit plusieurs variants de transcription.
• L'enzyme se localise principalement dans la lumière du réticulum endoplasmique, où se produit la modification post-traductionnelle des polypeptides de collagène naissants.
• Son activité catalytique dépend des cofacteurs fer (Fe²⁺), 2-oxoglutarate, oxygène moléculaire et ascorbate (vitamine C), ce qui la classe comme membre de la famille des dioxygénases dépendantes du 2-oxoglutarate.
• Le profil d'expression tissulaire révèle les niveaux les plus élevés dans le cœur, le placenta, le poumon et le pancréas, ce qui concorde avec les tissus riches en collagène de type I et IV.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée ; la protéine est également annotée avec des domaines de liaison au fer et aux métaux, et ses défauts sont associés à des variants de la maladie.
• La protéine contient des motifs de répétition tétratricopeptidique (TPR), qui sont impliqués dans les interactions protéine-protéine et l'assemblage du complexe prolyl 4-hydroxylase.

Guidance Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond aux résidus 239-333 du P4HA2 humain, une région qui présente une conservation de séquence élevée chez les mammifères ; envisagez de vérifier l'alignement pour votre organisme modèle.
• Pour le Western blot (WB), une bande attendue autour de 61 kDa devrait être observée ; utilisez des conditions réductrices sauf si autrement optimisé.
• En immunofluorescence/ICC, anticipez un marquage localisé au RE ; la co-coloration avec un marqueur du RE est recommandée.
• Pour l'ELISA, standardisez l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps dans votre système de test ; la réactivité croisée suggère une utilité pour les échantillons humains, de souris et de rat.
• L'hydroxylation du collagène étant un processus dynamique, envisagez d'utiliser la détection du P4HA2 dans les études sur la fibrose, le remodelage du stroma cancéreux ou les troubles du tissu conjonctif.

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