Anticorps monoclonal de lapin anti-p38 MAPK pour WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 est une kinase sérine/thréonine qui sert de composant central de la voie de la kinase MAP p38. Activée par des cytokines pro-inflammatoires et divers facteurs de stress, elle régule un vaste réseau de substrats en aval (estimé à 200–300 cibles) pour contrôler divers processus cellulaires, y compris l'expression des gènes, la stabilité des ARNm, la traduction et le renouvellement des protéines.
• Par la phosphorylation des kinases en aval MSK1/2 et MAPKAPK2/3/MNK1/2, MAPK14 orchestre la régulation transcriptionnelle et post‑transcriptionnelle. MSK1/2 activent les facteurs de transcription (CREB1, ATF1, NF‑κB, STAT1/3) et phosphorylent directement l'histone H3 et HMGN1 pour favoriser le remodelage de la chromatine et l'induction des gènes précoces immédiats. MAPKAPK2/3 contrôlent la stabilité des ARNm via ZFP36 et ELAVL1, tandis que MNK1/2 modulent la traduction par phosphorylation de eIF4E2. Références associées : PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• MAPK14 phosphoryle directement une gamme de facteurs de transcription, notamment TP53/p53 (en coopération avec la caséine kinase II), ATF1, ATF2, ELK1 et MEF2C/MEF2A, reliant ainsi les signaux de stress à une reprogrammation transcriptionnelle. Références associées : PMID:10747897, PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• La kinase régule la dégradation des protéines et la dynamique des récepteurs membranaires. Elle phosphoryle CFLAR pour promouvoir la dégradation par le protéasome, contrôle l'activité de la ligase d'ubiquitine SIAH2, et interfère avec le trafic d'ATG9 pour moduler l'autophagie. De plus, MAPK14 phosphoryle l'EGFR et les effecteurs RAB5A pour réguler l'endocytose médiée par la clathrine, et active le clivage de l'ectodomaine des ligands de l'EGFR par ADAM17. Références associées : PMID:17003045, PMID:19893488, PMID:16932740, PMID:20188673
• MAPK14 participe aux points de contrôle du cycle cellulaire et aux réponses aux dommages à l'ADN. Elle phosphoryle CDC25B et CDC25C, permettant la liaison des 14‑3‑3 et initiant un délai en G2 après irradiation UV. En cas de dommage à l'ADN, elle phosphoryle TIAR, ce qui libère TIAR de l'ARNm de GADD45A et empêche la dégradation du transcrit. Références associées : PMID:11333986, PMID:20932473
• Essentielle pour la croissance des vaisseaux sanguins du labyrinthe placentaire et pour l'érythropoïèse induite par le stress via la régulation de l'expression du gène EPO. MAPK14 déclenche également l'activation de l'inflammasome NLRP1 en aval des collisions ribosomiques, conduisant à la pyroptose. De plus, lors de l'infection par M. tuberculosis, la bactérie EsxA phosphoryle MAPK14 pour supprimer la production d'IFN‑γ dans les lymphocytes T. Références associées : PMID:10943842, PMID:35857590, PMID:21586573
• MAPK14 est exprimée dans un large éventail de tissus, avec les niveaux les plus élevés dans le cerveau, le cœur, le placenta, le pancréas et le muscle squelettique ; une expression plus faible est observée dans les poumons, le foie et les reins. Elle se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau. L'épissage alternatif produit des isoformes telles que MXI2 (activité kinase réduite) et EXIP (pro‑apoptotique). La protéine subit de multiples modifications post‑traductionnelles, y compris la phosphorylation, l'acétylation et la conjugaison de type ubiquitine.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100‑200) se situe dans une région conservée ; ainsi, une réactivité croisée avec la MAPK14 de souris et de rat est attendue. Validez la réactivité dans des lysats de cellules ou de tissus spécifiques à l'espèce pertinente avant une utilisation routinière.
• Pour le western blot, envisagez d'utiliser des extraits cellulaires totaux provenant de cellules stressées vs. au repos pour observer les décalages de bandes phospho‑spécifiques. Incluez toujours des contrôles appropriés (par exemple, anticorps anti-p38 phospho, inhibiteurs de kinase) pour garantir la spécificité du signal.
• En immunofluorescence/ICC, optimisez les conditions de fixation/permeabilisation et confirmez des profils de marquage cohérents avec une distribution cytoplasmique et nucléaire. Une co‑coloration avec des marqueurs de compartiment est recommandée.
• Pour l'ELISA, utilisez la protéine MAPK14 humaine recombinante comme standard et validez la linéarité de la détection. Associez cet anticorps à un anticorps de détection approprié pour développer un ELISA sandwich sensible.
• Étant donné que MAPK14 présente des fonctions indépendantes de l'activité kinase et de multiples isoformes, vérifiez que votre résultat expérimental reflète le rôle spécifique que vous souhaitez étudier.

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