Anticorps polyclonal anti-p38 MAPK pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q16539

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la p38 MAPK

• La protéine kinase 14 activée par les mitogènes (MAPK14), communément appelée p38 alpha, est une sérine/thréonine kinase activée par le stress appartenant à la famille des MAP kinases. Elle existe sous plusieurs isoformes, notamment EXIP et MXI2, générées par épissage alternatif.

• Lors de son activation par des signaux extracellulaires tels que des cytokines pro-inflammatoires ou un stress physique, la p38 phosphoryle les kinases en aval MSK1/2, qui régulent ensuite les facteurs de transcription (CREB1, NF-κB, STATs) et l'histone H3 (PubMed:9687510, PubMed:9792677). Elle active également MK2/3 pour contrôler la stabilité de l'ARNm via ZFP36 et ELAVL1, et MNK1/2 pour phosphoryler EIF4E2 pour l'initiation de la traduction (PubMed:11154262). Références associées : PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• La p38 régule le renouvellement des protéines en phosphorylant la ligase d'ubiquitine SIAH2 (PubMed:17003045) et l'inhibiteur d'apoptose CFLAR, et peut inhiber l'autophagie en interférant avec le trafic d'ATG9 (PubMed:19893488). Références associées : PMID:17003045 PMID:19893488

• Dans la dynamique des récepteurs, la p38 entraîne l'internalisation de l'EGFR médiée par la clathrine via la phosphorylation de l'EGFR lui-même et des effecteurs RAB5A (PubMed:16932740), et favorise le clivage du domaine extracellulaire des ligands de la famille du TGF-α en activant la métalloprotéase ADAM17 (PubMed:20188673). Références associées : PMID:16932740 PMID:20188673

• La p38 nucléaire phosphoryle directement les facteurs de transcription, notamment ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, TP53/p53 et MEF2A/C (PubMed:10330143, PubMed:9430721, PubMed:9858528), et améliore l'accessibilité de NF-κB aux promoteurs de gènes inflammatoires en augmentant la phosphorylation de l'histone H3 sur la Ser-10. Références associées : PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• La p38 contribue à la régulation du cycle cellulaire en phosphorylant CDC25B/C, entraînant un retard en phase G2 après irradiation ultraviolette (PubMed:11333986). Elle est également essentielle pour l'érythropoïèse développementale et induite par le stress via la régulation de l'expression du gène EPO (PubMed:10943842). Références associées : PMID:11333986 PMID:10943842

• Lors d'une infection, l'EsxA de M. tuberculosis peut activer la p38 dans les lymphocytes T, entraînant une inhibition de la production d'IFN-γ (PubMed:21586573). Références associées : PMID:21586573

• La p38 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau. Elle est largement exprimée, avec les niveaux les plus élevés dans le cerveau, le cœur, le placenta, le pancréas et le muscle squelettique, et des niveaux plus faibles dans le poumon, le foie et le rein. Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et l'ubiquitination, et elle est identifiée dans des études de protéomique.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (acides aminés 261–360 de la p38 humaine) est conservé entre l'humain, la souris et le rat, ce qui correspond à la réactivité croisée de l'anticorps. Vérifier par alignement de séquences avant d'étendre à d'autres espèces.
• Pour le Western blot, utiliser des conditions dénaturantes réductrices et une gamme de dilution d'anticorps de départ de 1:500 à 1:2000 ; optimiser avec des contrôles positifs appropriés (par exemple, HeLa, Jurkat).
• Pour l'IHC-P, une récupération antigénique (par exemple, tampon citrate, pH 6.0) peut être nécessaire ; valider la spécificité de la coloration avec un peptide bloquant ou des contrôles de tissus knockout.
• Pour l'IF/ICC, fixer avec du PFA à 4% et perméabiliser avec du Triton X-100 à 0,1% ; co-marquer avec des marqueurs nucléaires/cytoplasmiques.
• Pour l'IP, utiliser 1–2 µg d'anticorps pour 500 µg de lysat protéique et capturer avec des billes de protéine A/G.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; tester l'appariement avec un anticorps monoclonal apparié.

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