Anticorps monoclonal de lapin anti-p38 MAPK (validé KO) pour WB et ELISA - Q16539

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 est une sérine/thréonine kinase, membre de la famille des kinases p38 MAP. Elle est également appelée p38 alpha, CSBP, SAPK2A, et possède les isoformes MXI2 et EXIP. La protéine subit des phosphorylations et des acétylations, et elle est impliquée dans les réponses au stress, l'inflammation, l'apoptose et la régulation transcriptionnelle.

• En tant que composant central de la voie des MAP kinases, p38 MAPK est activée par des stimuli extracellulaires tels que les cytokines pro-inflammatoires et le stress physique. On estime qu'elle phosphoryle 200 à 300 substrats, orchestrant un large éventail de réponses cellulaires.

• Les kinases en aval MSK1 (RPS6KA5) et MSK2 (RPS6KA4) sont directement activées par p38 MAPK et phosphorylent les facteurs de transcription CREB1, ATF1, NF-kappa-B RELA, STAT1/3, ainsi que l'histone H3 et HMGN1, facilitant l'induction rapide des gènes immédiats-précoces et le remodelage de la chromatine. Références associées : PMID:9687510 PMID:9792677

• Régule l'expression génique post-transcriptionnellement via MK2 (MAPKAPK2) et MK3 (MAPKAPK3), qui phosphorylent des protéines de liaison à l'ARNm comme ZFP36 et ELAVL1, et contrôle la traduction par la phosphorylation médiée par MNK1/2 d'EIF4E2. De plus, elle interagit avec la caséine kinase II pour promouvoir la phosphorylation de TP53. Références associées : PMID:11154262 PMID:10747897

• p38 MAPK module l'endocytose des récepteurs (par exemple, l'internalisation de l'EGFR médiée par la clathrine via la phosphorylation de l'EGFR et des effecteurs RAB5A) et le clivage de l'ectodomaine en activant la métalloprotéase ADAM17, reliant les signaux inflammatoires à la signalisation par les facteurs de croissance. Références associées : PMID:16932740 PMID:20188673

• Dans le noyau, elle phosphoryle directement les facteurs de transcription ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, DDIT3, TP53, MEF2C et MEF2A, et renforce le recrutement de NF-kappa-B au niveau des promoteurs de gènes inflammatoires en induisant la phosphorylation de la sérine 10 de l'histone H3. Références associées : PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• Phosphoryle CDC25B/C entraînant un retard du cycle cellulaire en phase G2 après irradiation UV ; cible TIAR pour empêcher la dégradation de l'ARNm GADD45A ; et active l'inflammasome NLRP1 par phosphorylation, favorisant la pyroptose. Références associées : PMID:11333986 PMID:20932473 PMID:35857590

• Exprimée dans le cerveau, le cœur, le placenta, le pancréas et le muscle squelettique ; elle joue également un rôle essentiel dans l'érythropoïèse en régulant l'expression du gène EPO. Au cours d'une infection microbienne, la phosphorylation par l'EsxA de Mycobacterium tuberculosis inhibe la production d'IFN-gamma dans les lymphocytes T. Références associées : PMID:10943842 PMID:21586573

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été obtenu contre un peptide synthétique correspondant aux résidus 100-200 de la p38 MAPK humaine (Q16539), une région conservée chez la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée. Pour le Western blot, une bande d'environ 41 kDa est attendue. Diluez l'anticorps de manière adaptée et incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, des cellules stimulées par l'anisomycine ou par un stress osmotique) pour confirmer la réactivité.
• L'anticorps est validé par KO, ce qui garantit généralement la spécificité pour la cible ; cependant, chaque système expérimental est unique, donc effectuez une validation avec des échantillons knock-out ou un knock-down par siRNA selon les cas.
• Pour l'ELISA, prévoyez d'enrober avec de la p38 MAPK recombinante purifiée ou des lysats cellulaires de cellules stimulées. Les conditions du test peuvent nécessiter une optimisation de la concentration d'enrobage, du blocage et des étapes de détection.
• En tant qu'anticorps monoclonal de lapin, il convient généralement à l'obtention de résultats robustes et reproductibles. Associez-le à un conjugué d'anticorps secondaire anti-lapin adapté pour la détection dans votre protocole.

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