Anticorps polyclonal de lapin anti-OTUB1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q96FW1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'OTUB1

• OTUB1 est une enzyme déubiquitinante qui hydrolyse spécifiquement les chaînes polyubiquitines liées en 'Lys-48', jouant un rôle essentiel dans le renouvellement et la dégradation des protéines (PubMed:12401499, 12704427, 14661020). Références associées : PMID:12401499 PMID:12704427 PMID:14661020
• Le gène code pour deux isoformes par épissage alternatif : l'isoforme 1 (ubiquitaire) déstabilise RNF128 pour empêcher l'anergie des lymphocytes T, tandis que l'isoforme 2 (spécifique des tissus lymphoïdes) stabilise RNF128 et favorise l'anergie (PubMed:14661020). Références associées : PMID:14661020
• Outre son activité catalytique, OTUB1 agit de manière non catalytique dans la réparation des dommages à l'ADN en se liant à l'ubiquitine libre et en inhibant UBE2N/UBC13, limitant ainsi l'ubiquitination des histones liées en 'Lys-63' médiée par RNF168 (PubMed:20725033, 22325355). Références associées : PMID:20725033 PMID:22325355
• OTUB1 déubiquitine le récepteur alpha des estrogènes (ESR1) et peut éliminer les conjugués NEDD8, bien que son efficacité soit inférieure à celle sur l'ubiquitine liée en 'Lys-48' (PubMed:19383985, 18954305, 23827681). Références associées : PMID:19383985 PMID:18954305 PMID:23827681
• La phosphorylation au niveau du Tyr-26 régule l'activité de mTORC1 en médiant la déubiquitination non catalytique de RPTOR, tandis que la déubiquitination dépendante des acides aminés de DEPTOR peut inhiber mTORC1 et mTORC2 (PubMed:29382726, 35927303). Références associées : PMID:29382726 PMID:35927303
• La localisation sous-cellulaire est majoritairement cytoplasmique.
• L'isoforme 1 est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que l'isoforme 2 est limitée aux tissus lymphoïdes (amygdales, ganglions lymphatiques, rate) et aux cellules mononucléées du sang périphérique.
• OTUB1 appartient à la famille des protéases à thiol à domaine OTU et est classée comme hydrolase ; elle participe aux voies de l'immunité, de la réparation de l'ADN et de la conjugaison de l'ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (aa 1-220) de l'OTUB1 humaine, qui inclut le domaine OTU ; la réactivité croisée observée avec la souris et le rat suggère une conservation de cette région.
• Pour le western blot, attendez une bande proche de 31 kDa ; utilisez des contrôles positifs appropriés (par exemple, lysats de HeLa ou de Jurkat) et envisagez un knockdown par siRNA pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence/ICC, réalisez une fixation et une perméabilisation standard ; attendez un profil de coloration cytoplasmique.
• Pour les applications ELISA, optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et les dilutions de l'anticorps ; l'association avec un anticorps de détection peut faciliter le développement d'un test sandwich.
• Bien que l'anticorps ait démontré sa réactivité sur des échantillons humains, de souris et de rat, vérifiez systématiquement ses performances dans votre système expérimental spécifique.

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