Anticorps polyclonal anti-OTUB1 pour WB, ELISA - Q96FW1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'OTUB1

• L'OTUB1 est une ubiquitine thioestérase qui clive spécifiquement les chaînes de polyubiquitine liées par la Lys-48 des protéines, avec une activité beaucoup plus faible envers NEDD8 ; elle ne clive pas la di-ubiquitine (PubMed:12401499, 12704427, 14661020, 18954305, 23827681). Références associées : PMID:12401499 PMID:12704427 PMID:14661020 PMID:18954305 PMID:23827681
• Elle régule l'anergie des lymphocytes T en interagissant avec RNF128/GRAIL : l'isoforme 1 déstabilise RNF128 pour prévenir l'anergie, tandis que l'isoforme 2 stabilise RNF128 et favorise l'anergie (PubMed:14661020). Références associées : PMID:14661020
• L'OTUB1 joue un rôle non catalytique dans la réparation de l'ADN en inhibant l'E3 ligase RNF168 par liaison à UBE2N/UBC13, limitant ainsi la propagation des marques d'ubiquitination des histones liées par la Lys-63 sur les sites de dommages ; cette inhibition est régulée de manière allostérique par l'ubiquitine libre (PubMed:20725033, 22325355). Références associées : PMID:20725033 PMID:22325355
• Elle régule les complexes mTORC1 et mTORC2 via la déubiquitinylation non catalytique de RPTOR (lorsqu'il est phosphorylé sur la Tyr-26) et de DEPTOR (PubMed:29382726, 35927303). Références associées : PMID:29382726 PMID:35927303
• Déubiquitinyle le récepteur des œstrogènes alpha (ESR1) (PubMed:19383985). Références associées : PMID:19383985
• Localisation subcellulaire : principalement cytoplasmique.
• L'isoforme 1 est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que l'isoforme 2 est limitée aux tissus lymphoïdes (amygdales, ganglions lymphatiques, rate, cellules mononucléées du sang périphérique).
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (par exemple, Tyr-26) et l'acétylation, et la protéine est impliquée dans des processus tels que la réponse aux dommages à l'ADN, l'immunité adaptative et l'activité thiol protéase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 50–150 de l'OTUB1 humain, une région présente dans les deux isoformes ; gardez cela à l'esprit lors de l'interprétation des résultats dans des échantillons lymphoïdes par rapport aux échantillons non lymphoïdes.
• Pour le Western blot (WB), attendez-vous à une bande à environ 31 kDa. Optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps pour votre type d'échantillon spécifique.
• Pour l'ELISA, les formats direct et de capture peuvent être appropriés ; validez les conditions de revêtement et de détection avec une protéine purifiée ou des lysats.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'OTUB1 de souris, il peut donc être utilisé dans des modèles murins, mais vérifiez la spécificité dans votre système expérimental.
• Considérez le contexte fonctionnel : l'OTUB1 est impliqué dans la déubiquitinylation, la réparation de l'ADN et la signalisation mTOR, des contrôles appropriés (par exemple, état d'ubiquitinylation, induction de dommages à l'ADN) peuvent donc être nécessaires.

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