Anticorps Polyclonal Anti-OTOF pour WB, ELISA - Q9HC10

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Otoféline

• L'otoféline (protéine Fer-1-like 2) est une protéine à plusieurs isoformes ; l'isoforme 1 et 3 sont exprimées dans le cerveau adulte, tandis que l'isoforme 2 se trouve dans le fœtus et le cerveau adulte, le cœur, le placenta, le muscle squelettique et le rein.
• Agit comme un capteur de calcium clé au niveau des synapses en ruban des cellules ciliées internes (IHC) de la cochlée, déclenchant l'exocytose des vésicules synaptiques et la libération de neurotransmetteurs en interagissant avec les protéines SNARE présynaptiques de manière dépendante du calcium.
• Également essentielle pour l'exocytose synaptique dans les cellules ciliées externes (OHC) immatures et pourrait jouer un rôle dans le recyclage des endosomes.
• Appartient à la famille des protéines ferline, caractérisée par de multiples domaines C2 qui médient les interactions membranaires dépendantes du calcium.
• Se localise au niveau subcellulaire dans le vésicule cytoplasmique, la membrane du vésicule synaptique, la membrane basolatérale cellulaire, la membrane du réticulum endoplasmique, la membrane de l'appareil de Golgi, la membrane cellulaire présynaptique, la membrane cellulaire et le réseau trans-Golgien.
• Contient des régions transmembranaires et une ancre de signal, l'ancrant aux membranes des vésicules synaptiques et de la membrane plasmique présynaptique.
• Associée à la surdité génétique : les mutations provoquent une perte auditive non syndromique autosomique récessive (DFNB9) et des troubles du spectre de la neuropathie auditive.
• Les modifications post-traductionnelles et les caractéristiques structurelles incluent la liaison de métaux, des régions en hélice alpha (coiled-coil) et de multiples domaines C2 pour la liaison du calcium, cruciaux pour la fonction synaptique.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• Pour la WB, en raison de la grande taille de la protéine (~227 kDa), utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés ; vérifiez sur des lysats de tissus humains appropriés (par exemple, cerveau, tissu cochléaire).
• Pour l'ELISA, la région de l'immunogène (N-terminal 1-300) peut être utilisée pour capter ou détecter l'otoféline ; envisagez de l'associer à un autre anticorps ciblant un épitope distinct pour un ELISA sandwich.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent, car l'expression de l'otoféline est spécifique au tissu et les isoformes varient ; les lysats de cerveau humain ou les lignées cellulaires transfectées sont des témoins positifs appropriés.
• Puisque l'otoféline est une protéine vésiculaire synaptique, la fractionnement subcellulaire peut enrichir le signal dans les fractions membranaires.

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