Anticorps polyclonal de lapin anti-orexine B/hypocrétine-2 pour WB et ELISA - O43612

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’orexine B/hypocrétine-2

• Le précurseur du neuropeptide hypocrétine (prépro-orexine) est transformé en deux neuropeptides matures : l’orexine-A (hypocrétine-1) et l’orexine-B (hypocrétine-2), qui partagent une homologie de séquence mais présentent des profils de liaison aux récepteurs distincts.
• L’orexine-B/hypocrétine-2 se lie spécifiquement au récepteur de l’orexine HCRTR2/OX2R et joue un rôle essentiel dans la régulation centrale du comportement alimentaire, de l’homéostasie énergétique et des cycles veille-sommeil.
• Les neurones orexinergiques sont principalement localisés dans l’hypothalamus latéral ; au niveau subcellulaire, le précurseur se localise dans le réticulum endoplasmique rugueux, les vésicules cytoplasmiques et les synapses.
• L’orexine-B/hypocrétine-2 participe à la modulation de la sécrétion hypophysaire de l’hormone lutéinisante selon un mécanisme dépendant des stéroïdes ovariens, ce qui suggère un rôle dans la fonction reproductive neuroendocrinienne.
• Le précurseur contient un peptide signal, subit un clivage au niveau de paires de résidus basiques et présente des modifications post-traductionnelles, notamment l’amidation et la formation d’acide pyrrolidone-carboxylique, qui sont essentielles à sa bioactivité.
• Une expression abondante est détectée dans le noyau sous-thalamique, tandis qu’aucune expression détectable n’est observée dans les autres régions cérébrales et les tissus périphériques (l’hypothalamus n’a pas été testé).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique issu de la région N-terminale (aa 1-100) de l’orexine B/hypocrétine-2 humaine. Selon la préparation et le traitement de l’échantillon, l’anticorps peut reconnaître à la fois le précurseur et le peptide mature.
• Pour le Western blot (WB), tenir compte du poids moléculaire prédit du précurseur, d’environ 13 kDa, ainsi que de la taille plus faible du peptide orexine-B mature ; valider la détection à l’aide de témoins positifs appropriés, tels que des lysats de tissus cérébraux ou une protéine recombinante.
• En ELISA, évaluer le dépôt direct du peptide ou les formats sandwich ; analyser la réactivité croisée potentielle avec l’orexine-A en raison de la similarité de séquence dans la région de l’immunogène.
• Inclure des témoins positifs et négatifs appropriés, et optimiser empiriquement les facteurs de dilution pour chaque application.

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