Anticorps monoclonal anti-OGT pour WB, ELISA, ChIP - O15294

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'OGT

• L'OGT (sous-unité 110 kDa de l'UDP-N-acétylglucosamine--peptide N-acétylglucosaminyltransférase) est la sous-unité catalytique du complexe O-GlcNAc transférase, responsable de l'ajout d'un seul N-acétylglucosamine (O-GlcNAc) aux résidus sérine/thréonine des protéines nucléaires et cytoplasmiques (PubMed:12150998, PubMed:15361863, PubMed:19451179). Références associées : PMID:12150998, PMID:15361863, PMID:19451179
• Il glycosyle une vaste gamme de substrats, notamment l'histone H2B, AKT1, AMPK, EZH2, MAPT/TAU et bien d'autres, régulant ainsi des processus clés tels que la transcription, la signalisation de l'insuline, l'autophagie et les rythmes circadiens (PubMed:19451179, PubMed:20200153, PubMed:21285374). Références associées : PMID:19451179, PMID:20200153, PMID:21285374
• L'OGT existe sous plusieurs isoformes, y compris une isoforme mitochondriale (mOGT) qui est cytotoxique et favorise l'apoptose, en particulier dans les cellules d'insulinome. Elle possède également une activité N-acétylglucosaminyltransférase spécialisée avec une préférence de substrat distincte (PubMed:31527085). Références associées : PMID:31527085
• L'enzyme se localise dans le noyau, le cytoplasme, les mitochondries et la membrane cellulaire, reflétant ses divers rôles fonctionnels.
• Les modifications post-traductionnelles de l'OGT incluent l'acétylation et la phosphorylation, et elle participe aux voies de conjugaison de l'ubiquitine. Les mots-clés soulignent également son implication dans l'apoptose, les rythmes biologiques, la régulation de la chromatine et les interactions hôte-virus.
• L'OGT est fortement exprimée dans le pancréas, avec des niveaux modérés dans le muscle squelettique, le cœur, le cerveau et le placenta, et des traces dans les poumons et le foie, ce qui correspond à son rôle dans la signalisation de l'insuline et l'homéostasie du glucose.

Guide expérimental et conseils techniques

• Le peptide immunogène correspond aux résidus 947–1046 de l'OGT humain, une région probablement exposée dans la protéine native ; envisagez d'utiliser cet anticorps pour un Western Blot en conditions dénaturantes où l'épitope est accessible.
• Pour les tests ChIP, validez les conditions de réticulation et la spécificité de l'anticorps avec des contrôles positifs et négatifs appropriés, compte tenu de l'association de l'OGT avec la chromatine.
• En Western Blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 117 kDa ; cependant, de multiples isoformes et des modifications post-traductionnelles étendues peuvent entraîner des bandes supplémentaires ou des décalages ; incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• Lorsque vous travaillez avec des échantillons de rongeurs, confirmez la réactivité dans les tissus de souris ou de rat, car l'anticorps présente une réactivité croisée ; une optimisation de la dilution et des conditions de blocage est recommandée.

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