Anticorps monoclonal de lapin anti-OGG1 pour WB, IHC-P, ELISA - O15527

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'OGG1

• L'OGG1 (N-glycosylase/ADN lyase) est une enzyme de réparation de l'ADN à double activité qui élimine les lésions 8-oxoguanine (8-oxoG) et 2,6-diamino-4-hydroxy-5-N-méthylformamidopyrimidine (FAPY) causées par les espèces réactives de l'oxygène.
• L'enzyme catalyse l'excision des bases endommagées via son activité glycosylase, suivie d'une réaction bêta-lyase qui clive le squelette de l'ADN en 3' du site abasique.
• Codée par le gène OGG1 (également connu sous le nom de MMH, MUTM, OGH1), de multiples isoformes sont produites par épissage alternatif.
• L'OGG1 se localise principalement dans le noyau (y compris le nucléoplasme, les speckles et la matrice) mais se trouve également dans les mitochondries, reflétant son rôle dans la maintenance des génomes nucléaire et mitochondrial.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, ce qui est cohérent avec son rôle fondamental dans la protection contre les dommages oxydatifs de l'ADN.
• En tant qu'enzyme multifonctionnelle, l'OGG1 appartient à la famille des ADN glycosylases/AP lyases et est essentielle pour la voie de réparation par excision de bases (BER).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à une région située dans les acides aminés 246–345 de l'OGG1 humain. Sur la base de l'homologie des séquences, l'anticorps peut réagir avec plusieurs isoformes issues de l'épissage alternatif ; confirmez la taille de bande attendue (prédite ~39 kDa) dans votre espèce cible par Western blot.
• Pour le WB, nous recommandons de tester l'anticorps à des dilutions standard (par exemple, 1:500–1:2000) avec des contrôles de charge appropriés, en utilisant des lysats de lignées cellulaires humaines ou de rat comme matériel positif.
• En IHC-P, optimisez les méthodes de démasquage antigénique (démasquage thermique, pH 6 ou 9) et assurez une perméabilisation nucléaire complète. Incluez des contrôles d'isotype et des contrôles d'absorption avec le peptide immunogène pour vérifier la spécificité.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de détection ou de capture ; l'associer à un autre anticorps OGG1 (par exemple, polyclonal) peut améliorer la sensibilité. Effectuez des titrages en damier pour déterminer les concentrations optimales.
• L'OGG1 étant une protéine de faible abondance dans certains tissus, envisagez d'enrichir les fractions nucléaires ou mitochondriales avant l'analyse.

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