Anticorps polyclonal anti-OGDH pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q02218

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'OGDH

• OGDH code pour le composant E1o (2-oxoglutarate déshydrogénase) du complexe multienzymatique 2-oxoglutarate déshydrogénase (OGDHC), également connu sous le nom d'alpha-cétoglutarate déshydrogénase (Alpha-KGDH-E1). Références associées : PMID:24495017 PMID:25210035 PMID:28435050
• Catalyse l'étape limitante et irréversible de la décarboxylation du 2-oxoglutarate en utilisant le diphosphate de thiamine (ThDP) et transfère l'intermédiaire succinyle à la sous-unité E2 (DLST), une étape clé du cycle de Krebs. Références associées : PMID:24495017 PMID:25210035 PMID:28435050
• Se localise principalement dans la matrice mitochondriale, mais une fraction de l'OGDHC réside dans le noyau où elle fournit du succinyl-CoA pour la succinylation des histones par KAT2A. Références associées : PMID:29211711
• Peut également décarboxyler le 2-oxoadipate in vitro, bien qu'avec une efficacité moindre, et pourrait agir sur le 2-céto-4-hydroxyglutarate (KHG) pour former du malyl-CoA. Références associées : PMID:28435050
• La protéine est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, et contient des sites de liaison pour le calcium et le magnésium.
• L'épissage alternatif génère de multiples variants de transcrits, et un peptide de transit dirige le précurseur vers les mitochondries avant son clivage en forme mature.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (aa 148–427) couvre une région centrale de l'OGDH, permettant la reconnaissance à la fois de la protéine pleine longueur et de produits de clivage potentiels ; confirmez la détection de la bande attendue d'environ 116 kDa dans les lysats pertinents.
• Pour le Western blot (WB), envisagez de charger des extraits cellulaires totaux ou enrichis en mitochondries et utilisez un gel SDS-PAGE à 6–8% pour une résolution optimale des protéines de haut poids moléculaire.
• Lors de la réalisation d'IHC-P ou d'IF/ICC, incluez une étape de perméabilisation pour permettre l'accès de l'anticorps aux compartiments mitochondriaux et nucléaires ; validez la spécificité du signal avec des contrôles appropriés.
• En ELISA, utilisez l'anticorps comme réactif de capture ou de détection après avoir confirmé la plage linéaire et la sensibilité avec de la protéine OGDH recombinante ou des standards de lysat.

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