Anticorps polyclonal de lapin anti-NUMA1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14980

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NUMA1

• La Protéine 1 de l'appareil mitotique nucléaire (NUMA1), également appelée NuMA, NMP-22 ou antigène SP-H, est une grande protéine à enroulement coiled-coil de 238 kDa codée par le gène NUMA1. C'est un composant majeur de la matrice nucléaire.
• NUMA1 joue un rôle essentiel dans la formation et le maintien des pôles du fuseau au cours de la mitose en ancrant les extrémités négatives des microtubules, assurant ainsi un alignement et une ségrégation corrects des chromosomes.
  Références associées : PMID:11956313 PMID:12445386
• Il intervient dans l'orientation et l'élongation du fuseau mitotique par des mécanismes dépendants de la dynéine-dynactine, en interagissant avec les complexes corticaux contenant GPSM2 et les protéines Gα, ainsi que les phosphoinositides comme le PI(4,5)P2.
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• NUMA1 est également requise pour l'assemblage des asters de microtubules mitotiques et la formation du fuseau anastral, régulant positivement la localisation de TNKS aux pôles du fuseau.
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• Au-delà de la mitose, NUMA1 est une protéine très abondante de la matrice nucléaire qui occupe la majorité du volume nucléaire, ce qui suggère un rôle structurel. Elle est essentielle à la différenciation épidermique et à la morphogenèse des follicules pileux.
• La localisation subcellulaire inclut le noyau, le nucléoplasme, la matrice nucléaire, les pôles du fuseau, les centrosomes, le cortex cellulaire et la membrane cellulaire latérale, ce qui reflète ses rôles dynamiques aussi bien en interphase qu'en mitose.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, l'ADP-ribosylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, comme annoté dans UniProt (liaison isopeptidique, conjugaison Ubl, glycoprotéine, lipoprotéine), qui peuvent réguler ses fonctions.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Compte tenu du poids moléculaire élevé de NUMA1 (environ 238 kDa), pour le Western blotting, il est recommandé d'utiliser un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple 6-8%) et des temps de transfert prolongés pour garantir un transfert efficace.
• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1 à 309) de NUMA1 humaine ; vérifiez que cette région n'est pas masquée par des modifications post-traductionnelles ou des partenaires de liaison dans vos échantillons.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), NUMA1 présente une localisation nucléaire dans les cellules en interphase et une localisation aux pôles du fuseau dans les cellules en mitose ; optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour préserver l'antigénicité.
• En immunohistochimie (IHC), des méthodes de démasquage antigénique peuvent être nécessaires pour les tissus fixés au formol et inclus dans la paraffine ; validez les profils de coloration par rapport aux localisations subcellulaires connues.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre peut survenir ; incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés dans chaque expérience.

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