Anticorps monoclonal anti-NUDT5 pour WB, IF/CCI, ELISA - Q9UKK9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NUDT5

• NUDT5 est une enzyme à double fonction : en l'absence de diphosphate, elle agit comme une ADP-sucre pyrophosphatase, hydrolysant divers nucléosides diphosphates modifiés ; en présence de diphosphate, elle catalyse la synthèse d'ATP. Références associées : PMID:27257257
• En tant qu'ADP-sucre pyrophosphatase, NUDT5 hydrolyse des substrats tels que l'ADP-ribose, l'ADP-mannose, l'ADP-glucose, le 8-oxo-GDP et le 8-oxo-dGDP avec des efficacités similaires. Références associées : PMID:10567213, PMID:10722730, PMID:17052728
• Dans le noyau, NUDT5 médie la synthèse d'ATP en convertissant l'ADP-ribose en ATP et ribose-5-phosphate, une réaction dépendante de sa déphosphorylation sur la Thr-45. Références associées : PMID:27257257
• La génération nucléaire d'ATP par NUDT5 est cruciale pour les événements de remodelage de la chromatine consommateurs d'énergie. Références associées : PMID:27257257
• NUDT5 présente une activité de décapsage in vitro sur l'ARN coiffé par l'UDP-GlcNAc, clivant le pont pyrophosphate de la coiffe glucidique. Références associées : PMID:38716860
• NUDT5 se lie à l'ARNsn U8 mais ne le décoiffe pas, suggérant un rôle dans le métabolisme des ARN au-delà de ses activités enzymatiques.
• La protéine est localisée dans le noyau et est largement exprimée, avec les niveaux les plus élevés dans le foie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Puisque l'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1–100), l'anticorps est censé reconnaître le NUDT5 de pleine longueur et potentiellement tout isoforme contenant cette région ; validez toujours dans votre système cellulaire ou tissulaire.
• Pour le Western blot, une dilution de départ de 1:1000 est couramment utilisée pour les anticorps monoclonaux, mais une optimisation par une série de dilutions est recommandée.
• En immunofluorescence/CCI, une perméabilisation avec du Triton X-100 ou un détergent similaire est nécessaire pour accéder au NUDT5 nucléaire ; une fixation au méthanol peut également aider à préserver l'antigénicité.
• La pré-adsorption avec le peptide immunisant peut servir de contrôle de spécificité à la fois en WB et en IF/CCI.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été rapportée ; cependant, un alignement de séquences de la région N-terminale peut aider à prédire la réactivité avec d'autres espèces.
• Pour l'ELISA, un enrobage direct de l'antigène et un titrage de l'anticorps sont suggérés ; envisagez d'utiliser la protéine recombinante NUDT5 pour les courbes standards.

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