Anticorps polyclonal anti-NUDT16 pour WB, ELISA - Q96DE0

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NUDT16

• NUDT16 est une enzyme multifonctionnelle, annotée comme enzyme de décapage de l'U8 snoRNA, également connue sous les noms de phosphatase de l'IDP (IDPase), d'hydrolase 16 de la famille Nudix et de protéine de liaison à l'U8 snoRNA H29K.
• Dans son rôle d'enzyme de décapage de l'ARN, NUDT16 catalyse le clivage dépendant des métaux de la structure coiffe de l'U8 snoRNA et des ARNm, un processus essentiel à la maturation de l'ARNr et au renouvellement des ARNm. Références associées : PMID:20385596, PMID:26121039
• L'enzyme agit également comme un agent d'assainissement des nucléotides, en hydrolysant les nucléotides puriques non canoniques (IDP, dITP, GDP, dGDP, XDP, ITP, dITP) en leurs formes monophosphates, avec une préférence de substrat IDP > dIDP >> GDP = dGDP > XDP = ITP = dITP, empêchant ainsi leur incorporation dans les acides nucléiques. Références associées : PMID:20385596
• NUDT16 se localise dans plusieurs compartiments, notamment le noyau, le nucléoplasme, le nucléole et le cytoplasme, ce qui reflète ses fonctions diverses dans le traitement de l'ARN et le métabolisme des nucléotides.
• La protéine est largement exprimée, avec des niveaux particulièrement élevés dans les poumons, les reins, les glandes surrénales, les testicules, le cœur et le cerveau.
• NUDT16 nécessite des ions métalliques divalents tels que le manganèse ou le cobalt pour son activité catalytique et se lie fortement au GTP, à l'ITP et au XTP.
• Au-delà des structures coiffes canoniques, NUDT16 présente une activité de décapage envers les ARN coiffés par le NAD et le FAD, ainsi que, selon les rapports, envers les ARN coiffés par le dpCoA. Références associées : PMID:32432673

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène cible les acides aminés 60–130 au sein du domaine Nudix de NUDT16 humain. Cette région présente une forte conservation entre l'humain et la souris, ce qui est cohérent avec les données de réactivité croisée.
• Pour la détection par Western blot, utiliser des quantités modérées de lysat cellulaire total provenant de lignées cellulaires humaines ou murines (par exemple, 20–30 µg) et effectuer la détection selon des protocoles standard de chimioluminescence. Une bande proche de 21 kDa est attendue.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection. Il est recommandé d'optimiser la concentration de revêtement et le système de détection associé.
• Comme NUDT16 est une protéine faiblement abondante dans certains types cellulaires, l'enrichissement des fractions nucléaires ou l'utilisation de réactifs de détection plus sensibles peut améliorer le signal.
• Pour les études fonctionnelles, noter que NUDT16 se lie à l'ARN et aux ions métalliques ; l'anticorps reconnaît probablement la quantité totale de NUDT16, quel que soit son état de liaison.

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