Anticorps polyclonal de lapin anti-NUAK1 pour WB, ELISA - O60285

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NUAK1

• NUAK1, également connue sous le nom d’ARK5 (AMPK-related protein kinase 5) ou de kinase de l’omphalocèle 1, est une sérine/thréonine-protéine kinase appartenant à la famille NUAK des kinases apparentées à l’AMPK.
• Contrôle l’adhésion cellulaire en phosphorylant la sous-unité cible de la phosphatase de la myosine PPP1R12A, qui se lie ensuite aux protéines 14-3-3, entraînant une diminution de la déphosphorylation de la chaîne légère de la myosine et une modification de la contractilité actomyosine.
• Régule la sénescence cellulaire et la ploïdie par phosphorylation de LATS1 au niveau de Ser-464, affectant sa stabilité et, par conséquent, la voie de signalisation Hippo.
• Participe à la réponse aux dommages de l’ADN en phosphorylant p53/TP53 au niveau de Ser-15 et Ser-392, et est recrutée au promoteur de CDKN1A/WAF1 afin d’amplifier la transcription dépendante de p53.
• Médie la réponse aux dommages de l’ADN induits par les rayons UV : en complexe avec STK11, elle phosphoryle CDKN1A, favorisant sa dégradation afin de permettre une réparation efficace de l’ADN. Références associées : PMID:25329316
• Supprime l’apoptose induite par Fas en phosphorylant la caspase-6 (CASP6), ce qui inhibe son activation et le clivage consécutif de CFLAR.
• Se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, conformément à ses rôles dans la régulation de la transcription et la dynamique du cytosquelette.
• Est fortement exprimée dans le cœur et le cerveau, avec des niveaux plus faibles dans le muscle squelettique, les reins, les ovaires, le placenta, les poumons et le foie ; elle est surexprimée dans les lignées cellulaires du cancer colorectal, ce qui soutient son rôle dans la progression tumorale.
• Subit des modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la phosphorylation et la conjugaison à l’ubiquitine ; l’épissage alternatif génère plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 362 à 661, correspondant à la région C-terminale de NUAK1 humaine ; cette région peut contenir des domaines régulateurs. Il convient donc de tenir compte de la spécificité de l’anticorps dans les applications nécessitant une reconnaissance de l’extrémité N-terminale.
• Pour le western blot, le poids moléculaire prédit est de 74 kDa ; utiliser des conditions réductrices et valider avec des contrôles positifs appropriés, tels que des lignées cellulaires de cancer colorectal dans lesquelles NUAK1 est surexprimée.
• En ELISA, une détection indirecte peut être réalisée en utilisant l’immunogène recombinant comme antigène de revêtement ; confirmer la réactivité croisée avec des échantillons de rat dans votre système de test si nécessaire.
• Toujours effectuer un titrage de l’anticorps dans votre configuration expérimentale spécifique, car les dilutions optimales peuvent varier selon le type d’échantillon et la méthode de détection.

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