Anticorps Polyclonal Anti-NSUN2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q08J23

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de NSUN2

• NSUN2, également connu sous le nom de MISU, MRT5, SAKI ou TRM4, est une ARN cytosine C(5)-méthyltransférase qui catalyse la formation de 5-méthylcytosine (m5C) dans diverses espèces d'ARN, y compris les ARNt, les ARNm et les longs ARN non codants. Références connexes : PMID:17071714 PMID:22995836 PMID:31199786
• Il méthyle des résidus de cytosine spécifiques dans les précurseurs d'ARNt : les positions 34 et 48 de l'ARNt(Leu)(CAA) contenant un intron et les positions 48–50 de l'ARNt(Gly)(GCC), une modification essentielle pour la stabilité de l'ARNt et la génération de fragments dérivés des ARNt. Références connexes : PMID:17071714 PMID:22995836 PMID:31199786
• Dans les ARNm, la méthylation m5C médiée par NSUN2 recrute la protéine YBX1, qui se lie aux transcrits modifiés et les protège de la dégradation, améliorant ainsi la stabilité de l'ARNm. Références connexes : PMID:22395603 PMID:31358969 PMID:34556860
• Les modifications m5C dans l'ARNm facilitent également l'export nucléaire par reconnaissance par la protéine adaptatrice ALYREF/THOC4, liant la méthylation au trafic nucléo-cytoplasmique des transcrits. Références connexes : PMID:28418038
• NSUN2 méthyle les ARN vaut non codants (vtARN), tels que VTRNA1.1, favorisant leur traitement en petits ARN régulateurs (svRNA4) qui contrôlent la différenciation épidermique. Références connexes : PMID:23871666 PMID:31186410
• Il cible également les ARNt mitochondriaux pour la méthylation C5, étendant son rôle régulateur à l'expression des gènes mitochondriaux. Références connexes : PMID:31276587
• Au niveau subcellulaire, NSUN2 se trouve dans le nucléole, le nucléoplasme, le cytoplasme, les mitochondries et le fuseau mitotique, et il est sécrété via des exosomes, reflétant ses divers compartiments fonctionnels.
• Exprimé dans le cerveau adulte et fœtal et dans les cellules lymphoblastoïdes, NSUN2 est associé à des processus clés tels que le cycle cellulaire, la différenciation et la spermatogenèse ; des mutations sont liées à un handicap intellectuel.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• Pour le Western blot, envisagez de charger 20 à 50 µg de lysat protéique total ; la bande NSUN2 endogène apparaît à environ 86 kDa. Optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps primaire pour votre échantillon.
• En immunohistochimie (sections de paraffine), la récupération d'antigène induite par chaleur (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) est recommandée ; titrez l'anticorps pour obtenir une coloration spécifique.
• Pour l'immunofluorescence, testez la fixation avec du paraformaldéhyde à 4 % et la perméabilisation avec du Triton X-100 à 0,1 %. Incluez des témoins appropriés pour confirmer la localisation.
• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec NSUN2 de souris et de rat selon les données du fournisseur ; validez la spécificité dans l'espèce et le tissu d'intérêt à l'aide de modèles de knock-out ou de knockdown.
• L'immunogène couvre les acides aminés 617 à 708 (région C-terminale) ; soyez conscient que le sérum polyclonal peut reconnaître plusieurs isoformes ou produits de dégradation.
• Pour les applications ELISA, optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps, et incluez des puits de témoins négatifs pour évaluer le bruit de fond.

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