Anticorps polyclonal de lapin anti-NSF pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P46459

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NSF

• Identité protéique : La NSF (protéine de fusion sensible à la N-éthylmaléimide), aussi appelée ATPase de fusion de vésicules, SKD2 ou SEC18, est un membre de la famille des ATPases AAA codée par le gène NSF (ID du gène : 4905).
• Fonction principale : Cette protéine est essentielle pour le transport médié par les vésicules, catalysant la fusion des vésicules de transport dans les citernes de l'appareil de Golgi et facilitant le transport du réticulum endoplasmique vers l'empilement de Golgi.
• Livraison de cargaison : La NSF agit comme une protéine de fusion requise pour acheminer les protéines cargaison vers tous les compartiments de Golgi, indépendamment de l'origine de la vésicule, garantissant un trafic intracellulaire correct.
• Interaction avec les AMPAR : La NSF interagit avec la sous-unité GRIA2 du récepteur AMPA, influençant son cycle membranaire et modulant ainsi la plasticité synaptique (Par similarité).
• Localisation subcellulaire : La protéine réside principalement dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle dans les événements de fusion membranaire.
• Propriétés clés et associations avec des maladies : La NSF présente une activité de liaison à l'ATP et d'hydrolase, nécessite du magnésium comme cofacteur, et subit une phosphorylation et une acétylation. Les mutations du gène NSF sont liées à l'encéphalopathie développementale et épileptique (DEE96) et à la déficience intellectuelle.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été obtenu contre un fragment recombinant couvrant les acides aminés 251 à 400 de la NSF humaine, une région du domaine ATPase D2. Cela garantit la spécificité pour la protéine native.
• Western Blotting : Pour le WB, on peut s'attendre à une bande d'environ 83 kDa correspondant à la NSF endogène. Optimisez les conditions de blocage et de détection pour votre type d'échantillon (lysats humains, de souris ou de rat).
• Immunofluorescence / Immunocytochimie : En IF/ICC, la NSF doit présenter une coloration cytoplasmique. La perméabilisation est requise ; utilisez des méthodes de fixation appropriées pour préserver les épitopes.
• Immunoprécipitation : La nature polyclonale permet une capture efficace des complexes de NSF natifs. Validez l'efficacité de l'IP dans votre système et envisagez une réticulation si nécessaire.
• ELISA : L'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; réalisez des titrations en échiquier pour déterminer les concentrations optimales de revêtement et de détection.
• Considérations générales : En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, il reconnaît plusieurs épitopes, ce qui réduit le risque de perte de signal dû au masquage d'un seul épitope. Incluez toujours des contrôles positifs et négatifs spécifiques à vos conditions expérimentales.

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