Anticorps polyclonal de lapin anti-NRF2 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q16236

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NRF2

• NRF2 est un facteur de transcription qui se lie aux éléments de réponse antioxydante (ARE) présents dans les promoteurs de gènes cytoprotecteurs (par exemple, les enzymes de détoxification de phase 2) afin de neutraliser les électrophiles réactifs, jouant ainsi un rôle central dans l’homéostasie rédox cellulaire. Références associées : PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201

• Dans les conditions basales, NRF2 est ubiquitiné et dégradé dans le cytoplasme par l’intermédiaire du complexe de ligase E3 de l’ubiquitine KEAP1-CUL3-RBX1 ; le stress électrophile inactive ce complexe, entraînant la stabilisation de NRF2, sa translocation nucléaire, son hétérodimérisation avec les protéines Maf de petite taille et une transcription dépendante des ARE. Références associées : PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:19489739, PMID:29590092

• L’autophagie sélective déclenche également l’activation de NRF2 par l’interaction KEAP1-SQSTM1/p62, favorisant son accumulation nucléaire et l’expression de gènes cytoprotecteurs. Références associées : PMID:20452972

• Au cours de la réponse aux protéines mal repliées (UPR), NRF2 contribue à l’homéostasie rédox et à la survie cellulaire (par similarité).

• NRF2 est un régulateur essentiel de l’immunité innée : il inhibe les réponses inflammatoires des macrophages en bloquant la transcription des cytokines pro-inflammatoires et en inhibant le recrutement de l’ARN polymérase II au niveau des promoteurs de gènes pro-inflammatoires, indépendamment des motifs ARE et des niveaux de ROS (par similarité).

• NRF2 réprime la détection cytosolique de l’ADN viral en diminuant l’expression de STING1, ce qui réduit la réponse aux agonistes de STING1 et augmente la sensibilité à l’infection par les virus à ADN. Référence associée : PMID:30158636

• NRF2 limite la libération de cytokines pro-inflammatoires lors d’une infection par le SARS-CoV-2 et inhibe la réplication de plusieurs virus pathogènes (par exemple, HSV-1, HSV-2, la vaccine et Zika) par un mécanisme indépendant de l’interféron de type I. Référence associée : PMID:33009401

• NRF2 est une protéine d’environ 68 kDa largement exprimée (sa migration peut être plus élevée en raison de modifications post-traductionnelles), dont les niveaux sont les plus élevés dans les muscles, les reins, les poumons et le foie adultes ainsi que dans les muscles fœtaux ; son activité est modulée par la phosphorylation, l’acétylation, l’ub ubiquitination et la glycation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 243 à 400, englobant la région basique et le domaine leucine zipper ; il convient de noter que cette région peut améliorer la détection de la protéine native dans des conditions dénaturantes comme natives.
• Pour le Western blot, une bande proche de 68 kDa est attendue (la glycosylation ou d’autres modifications peuvent entraîner un poids moléculaire apparent légèrement supérieur) ; validez les résultats avec des contrôles positifs et négatifs appropriés dans des conditions réductrices.
• Pour l’immunohistochimie (IHC) et l’immunofluorescence (IF), une récupération antigénique à l’aide d’un tampon citrate et une perméabilisation (pour l’IF) sont recommandées ; une co-coloration avec un marqueur nucléaire peut aider à confirmer la translocation nucléaire de NRF2 lors de son activation.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec le NRF2 de souris et de rat ; vérifiez ses performances dans le tissu ou le lysat cellulaire de l’espèce concernée.
• Pour les applications ELISA, évaluez-le comme anticorps de capture ou de détection dans des immunoessais en sandwich et confirmez sa spécificité à l’aide d’une protéine recombinante ou d’extraits cellulaires.

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