Anticorps polyclonal anti-NRF2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16236

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NRF2

• NRF2 (facteur nucléaire 2 apparenté au facteur érythroïde 2, également connu sous le nom de NFE2L2) est un facteur de transcription codé par le gène NFE2L2, d'un poids moléculaire d'environ 68 kDa. Il appartient à la famille des protéines à domaine CNC-bZIP (basic-region leucine zipper).
• NRF2 joue un rôle central dans la défense cellulaire contre le stress oxydatif en se liant aux éléments de réponse antioxydants (ARE) présents dans les régions promotrices des gènes cytoprotecteurs, notamment ceux codant les enzymes de détoxification de phase 2, neutralisant ainsi les électrophiles réactifs. Références associées : PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• Dans les conditions basales, NRF2 est ubiquitiné et rapidement dégradé dans le cytoplasme par le complexe de ligase E3 de l'ubiquitine KEAP1-CUL3-RBX1. En présence d'un stress oxydatif ou électrophile, KEAP1 est inhibée, ce qui permet à NRF2 de s'accumuler, de migrer vers le noyau, de former un hétérodimère avec les petites protéines Maf et d'activer la transcription des gènes cibles. Références associées : PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201, PMID:19489739, PMID:29590092
• L'autophagie sélective active également NRF2 : le récepteur de l'autophagie SQSTM1/p62 interagit avec KEAP1, la séquestrant et entraînant ainsi l'inactivation de KEAP1, ce qui favorise l'accumulation nucléaire de NRF2 et l'expression des gènes cytoprotecteurs. Référence associée : PMID:20452972
• Au cours de la réponse aux protéines mal repliées (UPR), NRF2 est activé, contribuant à l'homéostasie rédox et à la survie cellulaire en cas de stress du réticulum endoplasmique.
• NRF2 inhibe l'inflammation médiée par les macrophages en bloquant la transcription des cytokines pro-inflammatoires et en inhibant le recrutement de l'ARN polymérase II à proximité des gènes pro-inflammatoires, indépendamment du motif de liaison canonique de NRF2 et des niveaux de ROS.
• NRF2 limite les infections virales : il réprime la détection de l'ADN cytosolique antiviral en supprimant l'expression de STING1 et inhibe la réplication de plusieurs virus pathogènes (par exemple, SARS-CoV-2, HSV-1, Vaccinia, Zika) par un mécanisme indépendant de l'interféron de type I. Références associées : PMID:30158636, PMID:33009401
• NRF2 est largement exprimé, avec des niveaux particulièrement élevés dans les muscles, les reins, les poumons et le foie adultes, ainsi que dans les muscles fœtaux. Il se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, se déplaçant dynamiquement en réponse aux signaux cellulaires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps polyclonal a été produit contre une protéine recombinante correspondant aux acides aminés 366-605 du NRF2 humain, ciblant la région C-terminale. Il peut détecter les formes totales et modifiées ; envisagez de vérifier sa spécificité dans votre système expérimental à l'aide de témoins de knockdown ou de knockout.
• Pour le Western blot, une bande située autour de 68 kDa est attendue. Les modifications post-traductionnelles, telles que la phosphorylation ou l'ubiquitination, peuvent entraîner des décalages de bande ; optimisez les témoins de chargement et les réactifs de détection.
• En IHC-P, les étapes de récupération antigénique et de blocage sont essentielles. Utilisez des tissus témoins positifs tels que le foie ou le rein, qui expriment des niveaux élevés de NRF2.
• Pour l'IF/ICC, les conditions de perméabilisation et de fixation doivent être optimisées ; la translocation nucléaire de NRF2 en situation de stress oxydatif peut être évaluée en comparant les cellules traitées et non traitées.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter l'utilisation d'un anticorps secondaire approprié ou l'intégration de l'anticorps dans une paire de capture ; validez l'analyse avec une protéine recombinante ou des lysats cellulaires.

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