Anticorps polyclonal de lapin anti-NPSR1 pour WB et ELISA - Q6W5P4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du NPSR1

• Le gène NPSR1 code pour le récepteur du neuropeptide S, également connu sous le nom de récepteur couplé aux protéines G 154 (GPR154), GPRA ou PGR14, un RCPG typique à sept domaines transmembranaires.
• L'activation du récepteur par le neuropeptide S (NPS) initie une double signalisation : l'activation de la phospholipase C dépendante de Gq mobilise le Ca²⁺ intracellulaire, et la stimulation dépendante de Gs augmente les niveaux d'AMPc (PubMed:15312648, PubMed:15947423, PubMed:16720571, PubMed:26865629). Références connexes : PMID:15312648 PMID:15947423 PMID:16720571 PMID:26865629
• Les voies du Ca²⁺ et de l'AMPc convergent toutes deux vers la phosphorylation d'ERK1/2, et la liaison du NPS inhibe finalement la croissance cellulaire (PubMed:15947423, PubMed:26865629). Références connexes : PMID:15947423 PMID:26865629
• L'épissage alternatif du NPSR1 génère plusieurs isoformes présentant des profils d'expression distincts : l'isoforme 1 prédomine dans le muscle lisse, tandis que l'isoforme 4 est ubiquitaire dans les tissus épithéliaux, y compris la bronche, l'estomac, l'intestin et l'utérus (PubMed:15947423). Références connexes : PMID:15947423
• Au niveau subcellulaire, le NPSR1 se trouve à la membrane cellulaire et peut transiter vers le cytoplasme, une caractéristique commune des RCPG activés.
• L'expression du NPSR1 est significativement augmentée dans le muscle lisse bronchique et l'épithélium des patients asthmatiques, liant ce récepteur à la physiopathologie de l'asthme (PubMed:15947423). Références connexes : PMID:15947423
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la glycosylation N-liée et les ponts disulfure conservés, critiques pour le repliement du récepteur et la liaison du ligand.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région C-terminale (aa 200–C-terminus) de l'isoforme 1 du NPSR1 humain (NP_001287863.1). Cette région est intracellulaire et peut être conservée entre les variants d'épissage ; vérifiez la réactivité avec votre isoforme spécifique d'intérêt.
• Pour le Western blot, une bande autour de 43 kDa est attendue pour le récepteur de pleine longueur, mais la glycosylation ou la dimérisation peuvent produire des espèces de poids moléculaire plus élevé. Validez la spécificité de l'anticorps dans des modèles cellulaires surexprimant le NPSR1 par rapport à des modèles avec knockdown ou knockout.
• Dans les applications ELISA, le revêtement direct avec le peptide immunogène ou le domaine extracellulaire recombinant du NPSR1 peut convenir. Optimisez les conditions de revêtement et incluez des témoins négatifs.
• Compte tenu de l'expression du récepteur dans le muscle lisse et l'épithélium, envisagez d'utiliser des lysats de cellules musculaires lisses bronchiques, du côlon ou de l'utérus pour les tests initiaux.
• Puisque le NPSR1 est un RCPG, des protocoles d'extraction de protéines membranaires sont recommandés pour une détection optimale en WB.

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