Anticorps polyclonal Anti-NPC2 (HE1, EDDM1) pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P61916

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du NPC2

• Le NPC2 (également connu sous le nom de HE1, EDDM1) est un transporteur intracellulaire de cholestérol qui joue un rôle critique dans la sortie du cholestérol du compartiment lysosomal.
• Il agit de concert avec NPC1 ; le cholestérol libéré des LDL dans les endosomes tardifs/lysosomes est transféré par NPC2 vers la poche de liaison au cholestérol de NPC1.
  Références connexes :
  PMID:17018531 PMID:18772377 PMID:27238017
• Le NPC2 lie le cholestérol avec une stœchiométrie de 1:1 et peut également lier une variété d'autres stérols, y compris les stérols végétaux.
  Références connexes :
  PMID:17018531
• La forme sécrétée du NPC2 régule la sécrétion biliaire de cholestérol par stimulation du transport médié par ABCG5/ABCG8.
• Au niveau subcellulaire, le NPC2 se trouve dans le lysosome, le réticulum endoplasmique et est sécrété.
• Il est détecté dans de multiples tissus, notamment la bile vésiculaire, les fibroblastes, le rein, le foie, la rate, l'intestin grêle, le placenta, le testicule et l'épididyme.
• La protéine contient un peptide signal et présente des modifications post-traductionnelles telles que des ponts disulfures, une glycosylation et une acétylation ; les mutations du NPC2 sont liées à la maladie de Niemann-Pick de type C2.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été élevé contre une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 20 à 151 du NPC2 humain, ce qui correspond à la protéine mature complète après clivage du peptide signal. Cette conception peut assurer la reconnaissance du NPC2 endogène.
• Pour le Western blot, prévoyez une bande à environ 17 kDa ; validez l'anticorps sur des lysats de contrôle positif (par exemple, fibroblastes humains ou tissu rénal) et envisagez d'utiliser un agent réducteur compte tenu de la présence de ponts disulfures.
• Dans les applications IHC-P ou IF-P, incluez des étapes appropriées de récupération d'antigène et vérifiez le coloration sur des coupes de tissus connus pour exprimer le NPC2 (tel que le rein ou le testicule).
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec le NPC2 de souris et de rat ; cependant, l'homologie de séquence entre les espèces doit être vérifiée pour les épitopes spécifiques, et l'anticorps doit être validé dans le modèle expérimental pertinent.

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