Anticorps polyclonal anti-NOXA2/p67phox pour WB, IF-P, ELISA - P19878

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NOXA2/p67phox (NCF2)

• Le facteur cytosolique 2 des neutrophiles (NCF2), également connu sous les noms de NOXA2, p67-phox, p67-PHOX et facteur de l'oxydase des neutrophiles de 67 kDa, est une sous-unité cytosolique du complexe NADPH oxydase des phagocytes.
• NCF2 est essentiel à la production de l'anion superoxyde (O2(-)) en assurant le transfert d'électrons du NADPH vers O2 au sein du complexe NADPH oxydase activé (PubMed:12207919, PubMed:38355798). Références associées : PMID:12207919, PMID:38355798
• L'activation du complexe NADPH oxydase est initiée par la liaison, dépendante de la phosphorylation, de la sous-unité cytosolique NCF1/p47-phox à CYBA/p22-phox, favorisant l'assemblage au niveau de la membrane plasmique ou de la membrane phagosomale.
• La protéine se localise dans le cytoplasme et se transloque vers les membranes lors de son activation.
• NCF2 est une phosphoprotéine qui contient des répétitions TPR et un domaine SH3, lesquels interviennent dans les interactions protéine-protéine au sein du complexe oxydase.
• Les mutations de NCF2 sont associées à la maladie granulomateuse chronique, une immunodéficience primaire caractérisée par une production défectueuse de superoxyde.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et l'isoforme canonique a un poids moléculaire d'environ 60 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 227–526 de NCF2 humain (NP_000424.2). En tant qu'anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs épitopes et réagir potentiellement avec des isoformes ou des orthologues.
• Pour le Western blot (WB), la bande cible attendue se situe autour de 60 kDa ; il convient d'optimiser la préparation du lysat et la dilution de l'anticorps afin d'obtenir une détection claire. Validez les résultats avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En immunofluorescence (IF-P), veillez à appliquer une fixation et une perméabilisation appropriées afin de détecter le NCF2 cytoplasmique et transloqué vers les membranes. Utilisez des lignées cellulaires ou des cellules primaires pertinentes.
• Pour l'ELISA, déterminez l'antigène de revêtement optimal et effectuez un titrage de l'anticorps afin d'atteindre la sensibilité et la spécificité souhaitées.
• Une réactivité croisée avec la souris est rapportée ; validez l'anticorps dans votre système d'échantillons spécifique s'il est utilisé pour des modèles non humains.

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