Anticorps monoclonal de lapin Anti-NOX2/gp91phox pour WB et ELISA - P04839

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NOX2/gp91phox

• NOX2 (gp91phox), codée par le gène CYBB, est la sous-unité catalytique du complexe NADPH oxydase des phagocytes, également connue sous le nom de chaîne lourde du cytochrome b-245.
• Elle médie le transfert d'électrons du NADPH cytosolique vers l'oxygène moléculaire, générant l'anion superoxyde (O2•−) essentiel à la défense de l'hôte. Références associées : PMID:15338276, PMID:36241643, PMID:36413210
• L'activation du complexe NADPH oxydase nécessite l'assemblage des sous-unités cytosoliques (par ex. NCF1/p47-phox) avec le complexe central lié à la membrane, déclenchée par une liaison dépendante de la phosphorylation. Références associées : PMID:19028840, PMID:38355798
• La protéine contient des sites de liaison pour le FAD, le NADP et deux fractions d'hème, facilitant les étapes séquentielles de transfert d'électrons pour la production de superoxyde.
• Localisée sur la membrane plasmique et la membrane phagosomale, elle permet la génération dirigée d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) lors de la phagocytose.
• Elle est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, la glycosylation et la formation de liaisons isopeptidiques, qui peuvent réguler son activité et son trafic.
• Les mutations du gène CYBB causent la maladie granulomateuse chronique (CGD), une immunodéficience caractérisée par une production défectueuse de superoxyde.
• Détectée majoritairement dans les neutrophiles au niveau protéique, ce qui souligne son rôle dans les réponses immunitaires innées.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100–200 de NOX2/gp91phox humain. Cette région peut englober des domaines extracellulaires ou proximaux de la membrane, ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître à la fois la protéine native et dénaturée.
• Pour le Western blotting, une bande d'environ 65 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; validez le signal dans des lysats de neutrophiles humains, de souris ou de rat appropriés.
• Lors de l'utilisation d'ELISA, envisagez un revêtement avec le peptide immunogène ou la protéine NOX2 recombinante pour confirmer la spécificité.
• Étant donné que l'activation de NOX2 implique un assemblage complexe, l'anticorps peut être utile pour les tests de co-immunoprécipitation afin d'étudier les interactions protéine-protéine, mais ces applications doivent être optimisées individuellement.

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