Anticorps polyclonal anti-NOL3 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60936

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine nucléolaire 3 (NOL3)

• NOL3 (protéine nucléolaire 3), également connue sous le nom de répresseur de l'apoptose avec domaine CARD (ARC) ou Nop30, est une protéine multifonctionnelle codée par le gène NOL3 chez l'homme. Elle appartient à la famille des répresseurs de l'apoptose et contient un domaine CARD.
• NOL3 bloque la voie apoptotique extrinsèque en interférant avec l'assemblage du complexe de signalisation induisant la mort (DISC) via des interactions avec FAS et FADD, et en limitant la disponibilité de la CASP8 par localisation mitochondriale dépendante de la phosphorylation (Par similarité).
• Dans la voie intrinsèque, NOL3 se lie directement à BAX, empêchant son activation, le dysfonctionnement mitochondrial et la libération de facteurs pro-apoptotiques. Références associées : PMID:15004034
• NOL3 agit comme un tampon cytosolique de calcium, se dissociant de la CASP8 pour maintenir l'homéostasie calcique, inhibant ainsi la mort cellulaire médiée par le calcium. Références associées : PMID:15509781
• D'autres rôles anti-apoptotiques incluent la suppression de l'apoptose induite par le stress oxydatif (via le blocage de l'activation de CASP2 et la translocation de BAX), de l'apoptose induite par l'hypoxie (inhibition de la libération de cytochrome c) et de la nécrose induite par le TNF (en abolissant le recrutement de RIPK1 au complexe I) (Par similarité).
• La localisation subcellulaire inclut le nucléole, le cytoplasme, les mitochondries, le réticulum sarcoplasmique et la membrane, ce qui est cohérent avec ses diverses fonctions dans l'épissage de l'ARN et la mort cellulaire.
• Spécificité tissulaire : fortement exprimé dans le cœur et le muscle squelettique ; détecté à de faibles niveaux dans le placenta, le foie, les reins et le pancréas.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), une bande spécifique d'environ 23 kDa est attendue dans des conditions dénaturantes réduites. Des lysats de cœur ou de muscle squelettique sont recommandés comme contrôles positifs.
• En immunohistochimie (IHC-P), un démasquage antigénique peut être nécessaire. Une coloration positive doit être observée dans les cardiomyocytes ou les fibres musculaires squelettiques ; pensez à utiliser des contrôles isotypes pour confirmer la spécificité.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), notez que NOL3 présente une coloration à la fois nucléaire et cytoplasmique. Une co-coloration avec des marqueurs d'organites (par exemple, mitotracker pour les mitochondries) peut aider à confirmer le ciblage subcellulaire.
• Lors de la mise en place d'un ELISA, l'immunogène recombinant de pleine longueur peut servir d'étalon ; la dilution de l'anticorps doit être optimisée empiriquement pour le format de dosage spécifique.
• En raison de la nature polyclonale, la cohérence entre lots doit être surveillée ; une validation initiale dans le système d'échantillon concerné est recommandée avant des études à grande échelle.

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