Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-NNMT pour WB, IF/ICC, ELISA - P40261

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NNMT

• La NNMT est une méthyltransferase cytoplasmique qui catalyse la N-méthylation de la nicotinamide, une étape clé dans l'élimination de la vitamine B3 (nicotinamide), en utilisant la S-adénosyl-L-méthionine (SAM) comme donneur de méthyle.
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• En consommant la SAM, la NNMT régule le potentiel de méthylation cellulaire et médie des modifications épigénétiques, réduisant notamment la marque histone répressive H3K27me3, favorisant ainsi des changements transcriptionnels globaux.
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• La NNMT contribue à l'état pluripotent des cellules souches embryonnaires en limitant les niveaux de H3K27me3, caractéristiques du paysage épigénétique pré-implantation.
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• En tant que régulateur métabolique, la NNMT influence la dépense énergétique du tissu adipeux blanc, la gluconéogenèse hépatique et la biosynthèse du cholestérol, en partie en affectant le flux des polyamines et les voies de récupération du NAD+.
• La NNMT peut N-méthyler d'autres composés pyridines structurellement apparentés à la nicotinamide, suggérant un rôle dans la détoxification des xénobiotiques.
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• Exprimée principalement dans le foie, avec des niveaux plus faibles dans le rein, le poumon, le muscle squelettique, le placenta et le cœur ; non détectée dans le cerveau ou le pancréas.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la citrullination, et la protéine est un membre bien caractérisé du protéome de référence avec des preuves de séquençage direct.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine recombinante couvrant la séquence complète de la NNMT humaine (aa 1–264). Cette conception est censée générer des anticorps reconnaissant la structure protéique native ; cependant, une validation empirique est recommandée pour chaque application.
• Pour le Western blot, une bande autour de 30 kDa est attendue. Optimisez la dilution de l'anticorps et les conditions de détection en utilisant des contrôles positifs appropriés (par exemple, un lysat de foie) et envisagez une fractionnement subcellulaire pour enrichir les protéines cytoplasmiques.
• En immunofluorescence/ICC, la NNMT est cytoplasmique. Utilisez des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés pour préserver les antigènes cytoplasmiques, et validez avec des tissus négatifs connus (par exemple, le cerveau).
• Pour les applications ELISA, les formats directs ou sandwich peuvent être testés, avec un titrage minutieux de l'antigène de revêtement et de l'anticorps. La réactivité croisée avec la NNMT de souris et de rat peut permettre le développement d'essais multi-espèces, mais l'homologie des séquences doit être vérifiée.
• Aucune dilution ou donnée de performance pré-validée n'est fournie ; chaque système expérimental nécessite une optimisation individuelle.

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