Anticorps polyclonal Anti-NME1/NM23A pour WB, IF/ICC, ELISA - P15531

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NME1/NM23A

• NME1/NM23A, également connu sous le nom de nucléoside diphosphate kinase A (NDK A) ou NM23-H1, est un membre ubiquitaire de la famille des nucléoside diphosphate kinases et a été initialement identifié comme un inhibiteur de métastase.
• Activité nucléoside diphosphate kinase principale : catalyse le transfert du groupe gamma-phosphoryle de l'ATP vers les nucléoside diphosphates (GDP, CDP, UDP, etc.), maintenant l'homéostasie des nucléoside triphosphates ; phosphoryle également les pyrophosphates de géranyl et de farnésyl, établissant un lien avec le métabolisme des isoprénoïdes. Références connexes : PMID:10952986, PMID:14960567, PMID:16313181
• Des fonctions kinases supplémentaires non spécifiques ont été démontrées, incluant des activités sérine/thréonine et histidine protéine kinase, suggérant des rôles dans la transduction du signal. Références connexes : PMID:8529641, PMID:9038158
• NME1 possède des activités de nucléolyse de l'ADN : il agit comme une endonucléase d'ADN simple brin dépendante du Mg²⁺ au sein du complexe SET, coopérant avec TREX1 pour médier la fragmentation de l'ADN apoptotique, et fonctionne également comme une exonucléase d'ADN 3′‑5′. Références connexes : PMID:12628186, PMID:16818237, PMID:11694515, PMID:14960567, PMID:16313181
• Nécessaire pour la motilité cellulaire et impliqué dans la régulation de la métastase tumorale et de la différenciation cellulaire. Références connexes : PMID:8270257, PMID:25582197
• Localisation subcellulaire : trouvé dans le cytoplasme, le noyau et la membrane cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 10‑110 du NME1 humain, une région prédite comme étant accessible et conservée ; la réactivité croisée avec le rat implique une conservation de l'épitope entre les espèces.
• Pour le western blot (WB), une bande d'environ 17 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; optimisez la dilution de l'anticorps (par exemple, 1:500–1:2000) et les temps d'exposition en fonction de l'abondance de l'échantillon.
• IF/ICC peut nécessiter des protocoles de perméabilisation pour détecter les pools nucléaires et associés à la membrane ; un co-marquage avec des marqueurs spécifiques aux compartiments est recommandé.
• Des tests ELISA peuvent être développés en utilisant l'anticorps comme réactif de capture ou de détection ; le couplage avec un anticorps monoclonal apparié peut augmenter la spécificité pour les applications quantitatives.
• Comme NME1 est largement exprimé, utilisez des témoins positifs (par exemple, HEK293, HeLa) et négatifs (knockdown/knockout) appropriés pour valider la spécificité du signal.

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