Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-NLRC4 pour WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9NPP4

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de NLRC4

• NLRC4 (protéine 4 contenant le domaine CARD de la famille NLR) est un membre de la famille des protéines NLR, caractérisé par un domaine CARD N-terminal, un domaine NACHT central et des répétitions riches en leucine (LRR) C-terminales.
• Il agit comme un composant clé de l'inflammasome qui détecte indirectement les protéines des bactéries et champignons pathogènes, assemblant un complexe inflammasome pour promouvoir l'activation de la caspase-1, la production de cytokines et la pyroptose des macrophages. Références associées : PMID:15107016
• Lors de son activation, l'inflammasome NLRC4 entraîne la maturation dépendante de la caspase-1 et la libération des cytokines pro-inflammatoires IL-1β et IL-18.
• NLRC4 se localise principalement dans le cytoplasme et le cytosol, et en détectant des ligands bactériens, il s'oligomérise pour former le complexe inflammasome.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes : l'isoforme 1 est fortement exprimée dans le poumon, les leucocytes, les ganglions lymphatiques et le côlon ; l'isoforme 2 est exprimée de manière ubiquitaire avec une forte présence dans le poumon et la rate ; l'isoforme 4 est spécifique au cerveau.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, en accord avec sa régulation dans la signalisation immunitaire innée.
• Les mutations de NLRC4 sont liées à des syndromes auto-inflammatoires tels que le syndrome auto-inflammatoire familial au froid 4 (FCAS4) et l'auto-inflammation avec entérocolite infantile (AIFEC).

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 85-170 de NLRC4 humain ; vérifier l'homologie de séquence chez la souris et le rat pour assurer la réactivité croisée attendue.
• Pour le Western blot, NLRC4 migre à ~116 kDa ; inclure des contrôles positifs (par exemple, des lysats de macrophages stimulés par du LPS) et optimiser les conditions de transfert pour les protéines de haut poids moléculaire.
• En immunofluorescence/immunocytochimie, NLRC4 présente une coloration cytoplasmique, mais l'activation de l'inflammasome induit des agrégats ponctués ; envisager de traiter les cellules avec des composants bactériens ou de la flagelline pour visualiser cette relocalisation.
• Pour l'ELISA, titrer l'anticorps et la protéine recombinante pour établir les concentrations de travail optimales, et utiliser une paire d'anticorps appariée si disponible.
• Cet anticorps polyclonal peut détecter plusieurs isoformes ; confirmer l'identité des bandes par spectrométrie de masse ou par des sondes spécifiques d'isoforme si nécessaire.

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