Anticorps polyclonal anti-NHP2 pour WB, ELISA - Q9NX24

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NHP2

• La sous-unité 2 du complexe ribonucléoprotéique H/ACA (NHP2), également appelée membre 2 de la famille des protéines nucléolaires A (NOLA2) ou protéine snoRNP NHP2, est un composant central du complexe ribonucléoprotéique nucléolaire petit H/ACA (snoRNP).
• NHP2 est essentielle pour la biogenèse des ribosomes et le maintien des télomères. Au sein du snoRNP H/ACA, elle catalyse la pseudouridylation de l'ARNr, convertissant l'uridine en pseudouridine par isomérisation de la liaison ribosique de N1 vers C5. Chaque ARNr peut contenir jusqu'à 100 résidus de pseudouridine, qui contribuent à la stabilisation de la conformation de l'ARNr.
• La protéine est également impliquée dans le traitement correct et le trafic intranucléaire de TERC, le composant ARN de l'holoenzyme télomérase reverse transcriptase (TERT), influençant ainsi l'homéostasie des télomères.
• Au niveau subcellulaire, NHP2 se localise dans le noyau, où elle est enrichie dans les nucléoles et les corps de Cajal, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la modification de l'ARNr et la maturation de l'ARN de la télomérase.
• NHP2 est largement exprimée dans tous les tissus humains, notamment le cerveau, le côlon, le cœur, le rein, l'ovaire, le pancréas, le placenta, la prostate, le muscle squelettique, l'intestin grêle, la rate, le testicule et le thymus, avec des niveaux relativement plus faibles dans le foie.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et la formation de liaison isopeptidique (conjugaison Ubl). Les mutations de NHP2 sont associées à la dyskératose congénitale, une trouble de la biologie des télomères caractérisé par une insuffisance médullaire, des anomalies cutanées et une prédisposition au cancer.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps polyclonal a été généré contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1–153 de la NHP2 humaine ; il est attendu qu'il reconnaisse la NHP2 pleine longueur. La réactivité croisée avec la NHP2 de rat est rapportée ; il est recommandé de vérifier la réactivité dans d'autres espèces d'intérêt.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit de NHP2 est d'environ 17 kDa. Utilisez des compositions de gel appropriées (par exemple 12–15 % de SDS-PAGE) et des conditions de transfert adaptées aux protéines de faible poids moléculaire.
• Pour les applications ELISA, les concentrations optimales d'antigène de revêtement et les dilutions d'anticorps de détection doivent être déterminées empiriquement. Envisagez d'utiliser de la NHP2 recombinante ou des lysats cellulaires comme contrôles positifs.
• En tant que protéine nucléaire/nucléolaire, la préparation d'échantillons pour WB doit inclure un enrichissement nucléaire efficace ou l'utilisation de tampons de lyse appropriés pour solubiliser NHP2.
• Aucune donnée de performance quantitative n'est fournie ; validez toujours l'anticorps dans votre système expérimental spécifique avec des contrôles adaptés.

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