Anticorps polyclonal anti-NGLY1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q96IV0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NGLY1

• NGLY1 (N-glycanase 1) est une peptide:N-glycanase cytoplasmique qui catalyse le clivage des glycannes N-liés des glycoprotéines dénaturées, convertissant l'asparagine en acide aspartique.
• Cible préférentiellement les protéines portant des oligosaccharides de type hautement mannose plutôt que des glycannes de type complexe, et agit spécifiquement sur les protéines mal repliées rétrotransloquées du réticulum endoplasmique vers le cytosol, tout en laissant intactes les protéines natives.
• La déglycosylation par NGLY1 est une étape nécessaire à la dégradation médiée par le protéasome de certaines glycoprotéines mal repliées, la reliant à la voie de dégradation associée au réticulum endoplasmique (ERAD).
• L'enzyme est une métalloprotéase à zinc (mot-clé : Liaison métallique ; Zinc) et est soumise à des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation et la phosphorylation, suggérant des mécanismes de régulation.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes, qui peuvent avoir des propriétés fonctionnelles ou une distribution tissulaire distinctes.
• La structure tridimensionnelle de la protéine a été déterminée (mot-clé : Structure 3D), fournissant des informations sur son mécanisme catalytique et la reconnaissance de son substrat.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 74 kDa ; envisagez d'optimiser le pourcentage de gel et les conditions de transfert pour obtenir une séparation claire.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, une perméabilisation peut être nécessaire pour détecter la protéine NGLY1 cytoplasmique ; validez la coloration dans des cellules avec des niveaux d'expression connus.
• Dans les tests ELISA, testez différentes concentrations d'antigène de revêtement et différentes dilutions d'anticorps ; incluez des échantillons témoins positifs et négatifs pour garantir la spécificité.
• Étant donné la nature polyclonale, une variabilité entre lots est possible ; il est conseillé de valider chaque nouveau lot dans l'application prévue et le système d'échantillons.
• Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation ; stockez dans les conditions recommandées pour maintenir la stabilité de l'anticorps.

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