Anticorps polyclonal de lapin anti-NG2/CSPG4 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q6UVK1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NG2/CSPG4

• NG2/CSPG4 est un protéoglycane au sulfate de chondroïtine, également connu sous le nom de protéoglycane au sulfate de chondroïtine du mélanome (MCSP), codé par le gène CSPG4. C'est une grande protéine transmembranaire dont le domaine extracellulaire porte des chaînes de glycosaminoglycanes de sulfate de chondroïtine.
• Fonctionne comme un récepteur de surface cellulaire pour le collagène alpha 2(VI) et divers facteurs de croissance, modulant la prolifération cellulaire, la migration et la morphogenèse microvasculaire. Il inhibe également la croissance des neurites et l'effondrement du cône de croissance lors de la régénération axonale.
• Joue un rôle crucial dans l'invasion des cellules de mélanome en régulant la dégradation du collagène de type I dépendante de MPP16 et en améliorant l'activation du plasminogène tout en inhibant l'angiostatine, favorisant ainsi le remodelage tissulaire et l'angiogenèse.
• Agit comme un transducteur de signal via son extrémité C cytoplasmique, interagissant avec des protéines d'échafaudage et de signalisation pour promouvoir la formation de fibres de rétraction, la polarisation cellulaire et l'adhésion médiée par les intégrines via les voies Rho GTPase, CDC42, ACK1 et BCAR1.
• Active les cascades de signalisation FAK et ERK1/ERK2, contribuant à l'étalement et à la migration cellulaires.
• Se localise principalement à la membrane cellulaire, y compris la membrane cellulaire apicale, la membrane des lamellipodes et les projections de surface cellulaire.
• Détecté au niveau protéique dans les fibroblastes, le placenta et les cellules de mélanome malin, soulignant son importance dans la progression du cancer et les processus de développement.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la formation de liaisons disulfure et la glycosylation N-liée. Il présente une hélice transmembranaire et un peptide signal, le classant comme un protéoglycane transmembranaire de type I.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 1950–2210) réside dans le domaine cytoplasmique ; par conséquent, l'anticorps peut détecter à la fois les formes pleine longueur et tronquées de CSPG4 en western blot.
• En raison du poids moléculaire élevé (~251 kDa), envisagez d'utiliser un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple, 6 %) et des temps de transfert prolongés pour des résultats WB optimaux.
• Pour l'IHC-P, une récupération antigénique induite par la chaleur peut être nécessaire pour exposer l'épitope dans les tissus fixés au formol et inclus en paraffine.
• En IF/ICC, les étapes de perméabilisation sont essentielles pour permettre à l'anticorps d'accéder à l'épitope intracellulaire.
• La réactivité croisée confirmée avec la souris permet des études comparatives, mais une validation dans le système d'échantillon spécifique est recommandée en raison de différences potentielles dépendantes de l'espèce.
• Lors de la conception de dosages ELISA, l'appariement de cet anticorps avec un anticorps de capture ciblant un épitope extracellulaire peut donner des immunoessais sandwich efficaces.

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