Anticorps monoclonal de lapin anti-NG2/CSPG4 pour WB, ELISA - Q6UVK1

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NG2/CSPG4

• Le protéoglycane de chondroïtine sulfate 4 (NG2/CSPG4), également connu sous le nom de protéoglycane de chondroïtine sulfate du mélanome, est un grand protéoglycane membranaire impliqué dans la prolifération cellulaire, la migration et la morphogenèse microvasculaire.
• Il fonctionne comme un récepteur de surface cellulaire pour le collagène alpha 2(VI), facilitant la migration cellulaire sur des substrats riches en collagène. NG2/CSPG4 se lie à des facteurs de croissance et à des protéases de la matrice extracellulaire, modulant leur activité et contribuant à l'invasion des cellules de mélanome par dégradation du collagène de type I dépendante de MPP16.
• Au niveau subcellulaire, NG2/CSPG4 se localise à la membrane cellulaire, à la membrane apicale, à la membrane du lamellipode et à la surface cellulaire, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la polarité cellulaire, l'adhésion et la migration.
• L'expression tissulaire est prominente dans les cellules de mélanome malin, et également détectée dans les fibroblastes et le placenta au niveau protéique. Références connexes : PMID:36213313 PMID:32337544
• En tant que transducteur de signal, le domaine cytoplasmique recrute des protéines d'échafaudage et de signalisation, favorisant la formation de fibres de rétraction, la polarisation cellulaire via les GTPases Rho et l'adhésion médiée par les intégrines par les cascades CDC42, ACK1 et BCAR1. Il active également les voies FAK et ERK1/ERK2.
• Les caractéristiques structurelles clés incluent des ponts disulfure, un domaine transmembranaire et de multiples sites de glycosylation/phosphorylation, le classant comme une glycoprotéine et une phosphoprotéine impliquée dans l'angiogenèse, les processus de développement et le remodelage tissulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1340–1563 près de la région extracellulaire C‑terminale ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître la protéine NG2/CSPG4 pleine longueur d'environ 251 kDa en western blot. Validez la détection dans des lignées cellulaires de mélanome humain (par exemple, A375) ou des cellules transfectées avec CSPG4.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser des fragments du domaine extracellulaire CSPG4 recombinant ou des lysats cellulaires entiers de cellules exprimant CSPG4. Optimisez les conditions de revêtement et de détection en fonction du format spécifique de l'essai.
• Compte tenu du poids moléculaire élevé, utilisez un gel SDS-PAGE à 6–8 % et un temps de transfert prolongé pour le western blot afin d'assurer un transfert efficace du grand protéoglycane.

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