Anticorps polyclonal anti-NFKB1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P19838

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NFKB1

• NFKB1 code pour le précurseur p105 qui est traité en sous-unité active p50. p105 fonctionne comme facteur de rétention cytoplasmique pour les protéines NF-kappa-B, tandis que p50 constitue le complexe actif NF-kappa-B avec RELA/p65. Références associées : PMID:1423592

• NF-kappa-B est un facteur de transcription pléiotropique impliqué dans l'inflammation, l'immunité, la croissance cellulaire, la tumorigenèse et l'apoptose. Il existe sous forme d'homodimères ou d'hétérodimères de protéines contenant un domaine de type Rel, l'hétérodimère p65-p50 étant la forme la plus abondante.

• Le complexe NF-kappa-B p65-p50 se lie spécifiquement à la séquence consensus kappa-B 5'-GGRNNYYCC-3' dans les régions amplificatrices des gènes cibles, régulant les réponses immunitaires et de phase aiguë. Références associées : PMID:1740106, PMID:7830764

• NFKB1 est localisée à la fois dans le cytoplasme et le noyau, les complexes inactifs NF-kappa-B étant retenus dans le cytoplasme par les inhibiteurs I-kappa-B. Lors de la stimulation, I-kappa-B est phosphorylé et dégradé, permettant la translocation nucléaire de NF-kappa-B.

• Des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination régulent l'activité de NF-kappa-B.

• L'homodimère p50-p50 agit comme répresseur transcriptionnel mais peut devenir un activateur lorsqu'il est associé à BCL3.

• NFKB1 joue également un rôle dans la répression de la signalisation MAPK en se complexant avec MAP3K8 ; la dégradation de p105 dépendante du protéasome libère MAP3K8 active.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 740-964 de NFKB1, située dans la région C-terminale de p105. Par conséquent, l'anticorps est censé détecter le précurseur p105 de pleine longueur (~105 kDa) plutôt que la sous-unité p50 traitée. Prenez cela en compte lors de la conception de vos expériences pour distinguer p105 de p50.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 105 kDa est attendue. Optimisez les contrôles de charge et la dilution de l'anticorps pour votre système d'échantillon.
• En immunoprécipitation, validez la capacité de l'anticorps à capturer les complexes natifs de NFKB1 dans des conditions non dénaturantes.
• Pour IHC-P et IF/ICC, confirmez la localisation subcellulaire (cytoplasmique vs nucléaire) dans des conditions basales et stimulées pour refléter l'état d'activation de NF-kappa-B.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une titration de l'anticorps contre l'antigène recombinant ou les lysats cellulaires pour établir une concentration de travail adaptée.

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