Anticorps polyclonal de lapin anti-NFIL3 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q16649

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NFIL3

• NFIL3 (protéine régulée par le facteur nucléaire de l'interleukine-3), également appelée E4BP4, IL3BP1, NFIL3A ou NF-IL3A, est un régulateur transcriptionnel codé par le gène NFIL3 chez l'homme (GeneID : 4783). Il reconnaît et se lie à la séquence 5'-[GA]TTA[CT]GTAA[CT]-3', présente dans de nombreux promoteurs cellulaires et viraux.
• Il agit à la fois comme répresseur et activateur transcriptionnel. Il réprime la transcription à partir des promoteurs contenant des sites ATF et entre en compétition avec les facteurs de liaison à l'ADN PAR (DBP, HLF, TEF) pour le même site consensus. Il active la transcription du promoteur de l'interleukine-3 dans les lymphocytes T.
• NFIL3 est un composant essentiel de l'horloge circadienne, fonctionnant comme régulateur négatif de l'expression de PER2, influençant ainsi l'oscillation circadienne.
• Subcellulairement, il est localisé dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle de facteur de transcription. Il est exprimé dans divers tissus, notamment la vessie, l'estomac, la thyroïde, la moelle épinière, les ganglions lymphatiques, la trachée, la glande surrénale, la moelle osseuse et le muscle.
• Il est modifié post-traductionnellement par phosphorylation et ubiquitination (liaison isopeptidique, conjugaison Ubl), ce qui peut réguler son activité et sa stabilité.
• Il joue un rôle dans le développement des cellules immunitaires : il protège les pro-lymphocytes B de l'apoptose et est nécessaire au développement des précurseurs des cellules natural killer.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 133-462 de la NFIL3 humaine, couvrant une grande partie de la protéine. Cette région inclut le domaine de liaison à l'ADN et probablement des motifs fonctionnels critiques, ce qui rend l'anticorps adapté pour détecter la NFIL3 pleine longueur.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prévu est de 51 kDa. Utilisez des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de tissus à forte expression de NFIL3 comme les ganglions lymphatiques ou la moelle osseuse) et vérifiez la spécificité de la bande à l'aide d'échantillons knock-down ou knock-out si disponibles.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), assurez-vous d'une fixation et d'une perméabilisation appropriées pour accéder à la NFIL3 nucléaire. Ajoutez un contre-colorant nucléaire pour confirmer la localisation.
• Pour l'ELISA, envisagez de l'associer à un anticorps secondaire optimisé pour la détection des anticorps polyclonaux de lapin. Validez les conditions du test en utilisant la protéine NFIL3 recombinante ou des lysats cellulaires.
• Étant donné que l'anticorps a une réactivité croisée avec la NFIL3 de rat, il peut être utilisé pour des études interspécifiques, mais confirmez toujours la réactivité dans votre dispositif expérimental spécifique.

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