Anticorps monoclonal anti-NF-kB p65/RelA (Validé KO) pour WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q04206

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA est une sous-unité du complexe facteur de transcription NF-kB, qui existe sous forme d'homodimères ou d'hétérodimères ; l'hétérodimère avec NFKB1 est la forme la plus abondante et agit comme un activateur transcriptionnel.
• Il joue un rôle central dans l'inflammation, l'immunité, la différenciation, la croissance cellulaire, la tumorigenèse et l'apoptose via la régulation de l'expression des gènes cibles.
• L'activation de NF-kB implique la phosphorylation et la dégradation des inhibiteurs I-kB, conduisant à la libération et à la translocation nucléaire du complexe p65/RelA actif.
• Essentiel pour l'expression des gènes de cytokines dans les cellules T. Références associées : PMID:15790681
• Facteur de transcription clé régulant la réponse interféron lors de l'infection par le SARS-CoV-2. Références associées : PMID:33440148
• S'associe à la chromatine au niveau des régions promotrices de NF-kB via une interaction avec DDX1, modulant l'accessibilité du promoteur.
• Soumis à de multiples modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la phosphorylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui affinent son activité.
• Principalement cytoplasmique dans les cellules au repos, il se transloque dans le noyau après activation ; également présent dans le noyau dans des conditions basales.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique de la région C-terminale (aa 450-551) du NF-kB p65 humain. Pour des applications comme le WB, attendez-vous à une bande autour de 58-60 kDa ; envisagez d'utiliser des contrôles de charge appropriés et de valider le signal dans des lignées cellulaires KO.
• Cet anticorps convient à de multiples applications ; pour l'IF/ICC, des signaux nucléaires et cytoplasmiques peuvent être observés en fonction de l'état d'activation de NF-kB. Incluez des échantillons non traités et stimulés pour comparaison.
• Pour les tests ChIP, optimisez les conditions de réticulation et de sonication pour votre type cellulaire. La performance de l'anticorps doit être validée avec des régions de gènes cibles positives et négatives.
• Une réactivité croisée avec la souris, le rat et le singe est rapportée ; vérifiez toujours la spécificité dans votre espèce et tissu d'intérêt avant de passer à l'échelle supérieure.
• Lorsque vous utilisez cet anticorps validé KO, envisagez d'inclure un contrôle négatif (par exemple, lysat avec knockdown par siRNA ou KO CRISPR) pour confirmer la spécificité de la bande en WB.

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