Anticorps Monoclonal Anti-NF-kB p65/RelA pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP - Q04206

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de NF-kB p65/RelA

• La sous-unité NF-kB p65 (également connue sous le nom de RELA, NFKB3) est un composant central du complexe du facteur de transcription NF-kappa-B, un régulateur pléiotrope présent dans presque tous les types cellulaires.
• Les complexes NF-kappa-B sont des homo- ou hétérodimères formés par des protéines contenant un domaine de type REL ; l'hétérodimère de RELA et de NFKB1 (p50) est la forme la plus abondante et agit comme un activateur transcriptionnel.
• RELA/p65 joue un rôle central dans les réponses inflammatoires et immunitaires, ainsi que dans la différenciation, la prolifération, l'apoptose et la tumorigenèse cellulaires, en se liant aux sites kappa-B dans les promoteurs des gènes cibles.
• Dans les cellules non stimulées, les dimères NF-kappa-B sont retenus dans le cytoplasme par des inhibiteurs (I-kappa-B) ; lors de l'activation, I-kappa-B est phosphorylé et dégradé, permettant à RELA de transloquer dans le noyau pour réguler l'expression des gènes.
• RELA fait l'objet de modifications post-traductionnelles étendues, notamment l'acétylation, la phosphorylation, la méthylation, la S-nitrosylation et l'ubiquitination, qui ajustent finement son activité, sa stabilité et ses interactions.
• RELA est essentiel pour l'expression des gènes de cytokines dans les cellules T, comme démontré par des études fonctionnelles. Références connexes : PMID:15790681
• RELA a été identifié comme un facteur de transcription clé régulant la réponse à l'interféron lors de l'infection par le SARS-CoV-2. Références connexes : PMID:33440148
• La protéine est principalement localisée dans le noyau et le cytoplasme, avec un va-et-vient dynamique entre ces compartiments en fonction de l'état d'activation.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Pour le Western blot (WB), une bande spécifique autour de 60 kDa est attendue, cohérente avec le poids moléculaire calculé de NF-kB p65.
• Pour l'IHC-P et l'IF/ICC, une validation dans le tissu ou le système cellulaire pertinent est recommandée ; une récupération de l'antigène peut être nécessaire pour les sections incluses en paraffine.
• Les données de validation par KO indiquent une spécificité pour le RELA endogène ; il est conseillé aux utilisateurs d'inclure des témoins appropriés (par exemple, des lysats de cellules knockout) dans leurs expériences.
• Dans les essais ChIP, l'anticorps reconnaît le NF-kB p65 natif lié à la chromatine ; les conditions optimales de fixation et de cisaillement doivent être déterminées empiriquement.
• Bien que l'anticorps soit répertorié pour plusieurs applications, les conditions de chaque essai (par exemple, dilution, temps d'incubation) doivent être optimisées dans le laboratoire de l'utilisateur final.

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