Anticorps monoclonal anti-Neuropiline-1 (NRP1) pour WB, IF/ICC, ELISA - O14786

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Neuropiline-1 (NRP1)

• La Neuropiline-1 (NRP1), également appelée récepteur du facteur de croissance endothélial vasculaire 165 (VEGF165R) et CD304, est un récepteur glycoprotéique transmembranaire à passage unique dont le poids moléculaire prédit est d'environ 103 kDa. Elle appartient à la famille des neuropilines et fonctionne comme corécepteur pour les sémaphorines et les membres de la famille VEGF.
• Elle médie l'activité chiorépulsive des sémaphorines, en particulier la SEMA3A, et se lie au VEGF165, au PLGF-2 et au VEGFB pour réguler l'angiogenèse et le développement cardiovasculaire. La reconnaissance d'un motif CendR C-terminal (R/KXXR/K) sur les ligands déclenche l'internalisation cellulaire et la fuite vasculaire. Références associées : PMID:10688880, PMID:9288753, PMID:9529250, PMID:19805273
• La NRP1 est essentielle pour le développement du système nerveux, elle guide le traçage des axones des motoneurones et la migration neuronale, y compris la migration caudale des motoneurones faciaux au cours de l'embryogenèse.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire, le cytoplasme et la membrane mitochondriale, et peut également être sécrétée. Elle subit un épissage alternatif, produisant des isoformes avec des profils d'expression distincts.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la N-glycosylation, la formation de liaisons disulfure et la phosphorylation. Elle contient également des domaines de liaison à l'héparane sulfate/héparine, contribuant à son rôle de corécepteur des protéoglycanes.
• Dans les tissus humains, la NRP1 est fortement exprimée dans le cœur et le placenta, modérément dans le poumon, le foie, le muscle squelettique, le rein et le pancréas, et à faible niveau dans le cerveau adulte. Elle est également exprimée dans l'épithélium olfactif et les fibroblastes.
• La NRP1 agit comme facteur hôte pour l'infection par le SRAS-CoV-2 en se liant au motif RRAR du motif CendR sur la protéine Spike, facilitant l'entrée virale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats de cellules entières provenant de tissus exprimant la NRP1, comme le cœur ou le placenta, ou de lignées cellulaires transfectées. Notez que la protéine peut apparaître sous forme de plusieurs bandes en raison de la glycosylation et de l'épissage alternatif ; le poids non modifié prédit est d'environ 103 kDa, avec des bandes observées autour de 68 à 103 kDa rapportées dans la littérature.
• En immunofluorescence (IF/ICC), la NRP1 est principalement localisée à la membrane. Validez les conditions de fixation et de perméabilisation dans votre système cellulaire spécifique, car une perméabilisation excessive peut altérer la distribution du signal.
• Pour l'ELISA, cet anticorps, qui reconnaît le domaine extracellulaire (aa 22-644), peut être utilisé pour la capture ou la détection dans des immunoessais sandwich. Associez-le à un anticorps de détection dirigé contre un épitope différent ou utilisez-le comme anticorps de détection en combinaison avec un anticorps de capture ; effectuez un titrage pour optimiser le rapport signal sur bruit.
• Étant donné que l'immunogène couvre quasiment toute la région extracellulaire, l'anticorps peut reconnaître plusieurs isoformes de NRP1. La réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas garantie ; validez-la si nécessaire.

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