Anticorps monoclonal anti-neurofilament L pour WB, IF, IHC, ELISA - P07196

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la neurofilament polypepide légère

• La neurofilament polypepide légère (NEFL) est un membre de la famille des filaments intermédiaires et l'une des trois principales protéines de neurofilaments, avec NEFM et NEFH. Ensemble, elles maintiennent le calibre neuronal et la structure axonale.
• NEFL coopère avec d'autres protéines de filaments intermédiaires neuronaux telles que la périférine (PRPH) et l'alpha-internéxine (INA) pour former les réseaux filamentaires essentiels à l'intégrité neuronale.
• La protéine est majoritairement exprimée dans les axones, se localisant dans le cytoplasme et le cytosquelette des cellules neuronales, et joue un rôle critique dans la croissance radiale des axones.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la glycation, la méthylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui régulent l'assemblage des filaments, leur stabilité et leurs interactions avec d'autres composants du cytosquelette.
• Les mutations du gène NEFL sont liées à des troubles neurodégénératifs, notamment la maladie de Charcot-Marie-Tooth types 1F et 2E, ce qui souligne son rôle dans le maintien axonal et la susceptibilité à la neuropathie.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 61,5 kDa (calculé à partir de la séquence) et est souvent détectée sous forme de bande de 68 kDa par SDS-PAGE en raison des modifications post-traductionnelles.
• NEFL, associée à d'autres sous-unités de neurofilaments, sert de biomarqueur des dommages neuronaux dans des pathologies telles que la sclérose en plaques, la maladie d'Alzheimer et les lésions cérébrales traumatiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspondant à la région des acides aminés 60-250, une région centrale de la protéine NEFL humaine, l'anticorps reconnaît probablement un épitope conservé ; pensez à réaliser un alignement de séquence avant de l'utiliser pour des espèces non humaines pour confirmer sa réactivité.
• Pour le Western blot, une bande proche de 68 kDa peut être observée ; validez le résultat en comparant avec le poids moléculaire attendu et en utilisant des contrôles de chargement appropriés tels que la β-actine ou le GAPDH.
• En immunofluorescence, les conditions optimales de fixation et de perméabilisation doivent être testées ; la fixation au paraformaldéhyde suivie d'une perméabilisation au Triton X-100 est couramment utilisée pour la coloration des neurofilaments.
• En immunohistochimie, les méthodes de récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate à température élevée) peuvent améliorer la détection ; n'oubliez pas d'inclure des contrôles tissulaires positifs et négatifs.
• Lors de l'utilisation de l'anticorps en ELISA, assurez-vous que l'antigène de revêtement correspond à la région de l'immunogène pour éviter la réactivité croisée avec d'autres sous-unités de neurofilaments.

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