Anticorps monoclonal anti-Neurofilament H pour WB, IP, ELISA - P12036

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Neurofilament H (NFH)

• Le Neurofilament H (NFH), également connu sous le nom de protéine neurofilamentaire de 200 kDa ou protéine neurofilamentaire triplet H, est un composant polypeptidique lourd des filaments intermédiaires neuronaux.
• Le NFH est essentiel au maintien du calibre neuronal et joue un rôle critique dans les axones matures, rôle qui n'est pas compensé par les protéines neurofilamentaires plus petites NEFL et NEFM.
• Il peut coopérer avec d'autres protéines de filaments intermédiaires neuronaux telles que la périphérine (PRPH) et l'internexine (INA) pour former des réseaux filamenteux dans les neurones (par similarité).
• La protéine se localise dans le cytoplasme, en particulier au sein du cytosquelette des axones, où elle contribue à l'intégrité structurelle et au transport axonal.
• Le NFH subit une phosphorylation post-traductionnelle extensive, qui est supposée réguler l'assemblage des filaments et les interactions avec d'autres éléments du cytosquelette.
• L'épissage alternatif du gène NEFH produit de multiples isoformes, modulant potentiellement sa fonction.
• Des variants génétiques dans NEFH sont associés à des maladies neurodégénératives, notamment la sclérose latérale amyotrophique (SLA) et la maladie de Charcot-Marie-Tooth de type 2CC (CMT2CC), soulignant sa pertinence clinique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 550–650 du Neurofilament H humain, une région qui peut être conservée entre les espèces (sur la base des données de réactivité croisée), suggérant un épitope antigénique robuste.
• Pour le Western Blot (WB), attendez-vous à une bande d'environ 112 kDa ; l'optimisation de la préparation des échantillons et des conditions de détection est recommandée en utilisant des lysats appropriés de cellules ou de tissus neuronaux.
• Dans les applications d'immunoprécipitation (IP), un prénettoyage et un titrage de l'anticorps peuvent améliorer la spécificité ; une détection WB ultérieure peut confirmer la cible.
• L'ELISA peut être utilisé pour une détection quantitative ; utilisez une protéine ou un peptide purifié comme contrôle et validez dans la matrice biologique pertinente.
• En raison du potentiel de modifications post-traductionnelles (par exemple, phosphorylation), envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver l'état endogène.
• Une réactivité croisée avec le Neurofilament H de souris et de rat est indiquée, permettant son utilisation dans des modèles rongeurs ; néanmoins, un alignement de séquences de la région épitopique dans les espèces cibles est recommandé.

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