Anticorps monoclonal anti-Nesprin3 (KASH3) pour WB, ELISA - Q6ZMZ3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Nesprin-3

• La Nesprin-3, également connue sous le nom de protéine 3 contenant le domaine KASH (KASH3) ou protéine 3 à répétition de spectrine de l'enveloppe nucléaire, est codée par le gène SYNE3 (C14orf139, C14orf49, LINC00341) et est un composant du complexe LINC (LInker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton).
• Elle agit comme une protéine d'ancrage qui attache le noyau au cytosquelette en se liant à la plectine (PLEC), qui interagit avec le système des filaments intermédiaires, médiant ainsi la connexion entre la lamina nucléaire et le cytosquelette.
• Le complexe LINC est essentiel pour transmettre les forces mécaniques à travers l'enveloppe nucléaire, et la Nesprin-3 joue un rôle dans le mouvement et le positionnement du noyau.
• Dans les cellules endothéliales aortiques, la Nesprin-3 est nécessaire à la polarisation du centrosome induite par le flux et à la migration directionnelle, et elle contribue à la régulation de la morphologie cellulaire.
• La Nesprin-3 se localise à la membrane nucléaire externe, à l'enveloppe nucléaire et au réticulum endoplasmique rugueux.
• Elle est exprimée au niveau protéique dans les cellules endothéliales aortiques.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 112 kDa, conforme à l'annotation UniProt, et présente des répétitions de spectrine, un domaine en hélice superenroulée et une hélice transmembranaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps a été généré en utilisant une protéine de fusion recombinante correspondant aux acides aminés 750–935 de la Nesprin-3 humaine, une région située dans le domaine à répétition de spectrine. Cette conception peut permettre la reconnaissance de la Nesprin-3 pleine longueur et d'isoformes potentiels générés par épissage alternatif.
• Pour le Western blot (WB), les lysats de cellules endothéliales aortiques humaines ou d'autres lignées cellulaires exprimant la Nesprin-3 sont des contrôles positifs appropriés. La taille de bande attendue est d'environ 112 kDa. Pensez à utiliser des contrôles de charge appropriés et à valider la réactivité dans les échantillons de souris si nécessaire.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Optimisez les conditions de revêtement et de détection en utilisant de la protéine Nesprin-3 recombinante purifiée ou des extraits cellulaires. La réactivité croisée avec d'autres protéines à domaine KASH doit être évaluée dans le contexte expérimental.
• L'expédition se faisant sur sacs de glace, assurez un stockage approprié à l'arrivée (par exemple, aliquotez et stockez à -20°C ou -80°C comme recommandé) pour maintenir la stabilité de l'anticorps.

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