Anticorps polyclonal Anti-Nesprin 1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8NF91

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Nesprin 1

• Le Nesprin-1 (protéine 1 à répétitions de spectrine de l'enveloppe nucléaire), codé par le gène SYNE1, est une protéine modulaire multi-isomérique d'un poids moléculaire d'environ 1011 kDa. Plusieurs variants d'épissage donnent naissance à des isoformes spécifiques aux tissus, notamment une forme plus petite d'environ 112 kDa.
• En tant que composant central du complexe LINC (Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton), le Nesprin-1 relie la lamina nucléaire au cytosquelette d'actine, facilitant la transmission des forces mécaniques à travers l'enveloppe nucléaire et régulant le positionnement et le mouvement du noyau.
• SYNE1 agit de manière redondante avec son paralogue SYNE2 dans des processus tels que l'attachement noyau-centrosome et la migration nucléaire dans les progéniteurs neuronaux, souvent en association avec des protéines de domaine SUN et des complexes moteurs dynéine-dynactine cytoplasmiques.
• À l'échelle subcellulaire, le Nesprin-1 se localise principalement à la membrane nucléaire externe, mais se trouve également au niveau de l'enveloppe nucléaire, du cytosquelette, des sarcomères et de l'appareil de Golgi, reflétant ses rôles diversifiés dans l'architecture intracellulaire.
• La protéine contient des répétitions de spectrine et un domaine KASH C-terminal, qui l'ancre à l'enveloppe nucléaire. Elle est sujette à la phosphorylation et potentiellement à d'autres modifications post-traductionnelles, comme l'indiquent les données de protéomique.
• Le Nesprin-1 est largement exprimé, avec les niveaux les plus élevés dans les muscles squelettique et lisse, le cœur, la rate et plusieurs autres tissus. Un isoforme court (GSRP-56) est principalement exprimé dans le cœur et le muscle squelettique.
• Les mutations de SYNE1 sont liées à la dystrophie musculaire d'Emery-Dreifuss et à d'autres troubles, soulignant le rôle critique de la protéine dans la fonction musculaire et la mécanique nucléaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 8220–8410 dans la région à répétitions de spectrine de l'isoforme 2 du Nesprin-1 humain. Cette séquence est conservée dans les orthologues de la souris et du rat, ce qui soutient la réactivité croisée.
• Pour la détection par Western blot, notez que le Nesprin-1 de pleine longueur (~1011 kDa) nécessite des protocoles de transfert de protéines de haut poids moléculaire spécialisés. Une bande plus facilement détectable près de 112 kDa peut représenter des isoformes plus petites ou des produits de clivage.
• Dans les applications d'immunofluorescence, le Nesprin-1 présente généralement un motif de coloration en bordure nucléaire et filamenteux cytoplasmique ; une fixation appropriée (par exemple, PFA à 4 %) et une perméabilisation sont recommandées.
• Lorsqu'il est utilisé en immunohistochimie sur coupes en paraffine, une récupération d'antigène peut être nécessaire ; validez la spécificité de la coloration avec des témoins positifs et négatifs appropriés.

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