Anticorps monoclonal anti-Nesprine 1 pour WB, IF/ICC et ELISA - Q8NF91

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Nesprine 1

• La Nesprine-1 (également appelée SYNE1, Enaptine, MYNE1, KASH1) est une protéine modulaire multi-isomérique qui forme un réseau de liaison entre les organites et le cytosquelette d'actine pour maintenir l'organisation spatiale subcellulaire.
• En tant que composant central du complexe LINC (Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton), elle relie la lamina nucléaire au cytosquelette, elle médie la transmission des forces mécaniques à travers l'enveloppe nucléaire et régule le mouvement et le positionnement du noyau.
• Avec SUN1/2 et les complexes moteurs cytoplasmiques dynéine-dynactine, la Nesprine-1 peut participer à l'attachement noyau-centrosome et à la migration nucléaire dans les progéniteurs neuronaux, SYNE1 et SYNE2 agissant de manière redondante.
• Elle est nécessaire à la migration du centrosome vers la surface apicale de la cellule au début de la ciliogenèse et peut contribuer au remodelage nucléaire lors de la formation de la tête du spermatozoïde via un complexe LINC probable SUN3:SYNE1/KASH1.
• Sa localisation subcellulaire inclut la membrane nucléaire externe, l'enveloppe nucléaire, le cytoplasme, le cytosquelette, le sarcomère des myofibrilles et l'appareil de Golgi.
• Elle est largement exprimée avec des niveaux élevés dans les muscles squelettiques et lisses, le cœur, la rate, les leucocytes du sang périphérique, le pancréas, le cervelet, l'estomac, le rein et le placenta ; l'isoforme GSRP-56 est majoritairement exprimée dans le cœur et le muscle squelettique.
• Les modifications post-traductionnelles et caractéristiques structurales clés incluent l'épissage alternatif, la phosphorylation, la formation de ponts disulfures, la présence de répétitions spectrine et d'une hélice transmembranaire, comme l'indiquent les mots-clés UniProt.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le western blot, la Nesprine-1 existe sous forme de plusieurs isoformes ; l'isoforme principal migre à environ 1011 kDa, tandis qu'un isoforme plus petit peut apparaître aux alentours de 112 kDa. Utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple 4-6 % de SDS-PAGE) et des temps de transfert prolongés pour garantir un transfert efficace des protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l'immunofluorescence / immunocytochimie, attendez un marquage au niveau de l'enveloppe nucléaire, du cytoplasme et éventuellement des structures du cytosquelette. Validez avec des marqueurs de localisation subcellulaire connus.
• Pour l'ELISA, assurez-vous que l'encoche d'antigène et la dilution de l'anticorps sont optimisées en utilisant l'immunogène recombinant comme étalon de référence.

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