Anticorps Monoclonal Lapin Anti-NEK7 pour WB, ELISA - Q8TDX7

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de NEK7

• NEK7 (Kinase 7 liée à NIMA) est une sérine/thréonine-protéine kinase qui joue un rôle essentiel dans la progression du cycle cellulaire mitotique, y compris la nucléation des microtubules du centrosome, la formation du fuseau mitotique et la cytocinèse.

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• Elle phosphoryle des cibles en aval telles que EML4 au niveau de la Ser-146, favorisant sa dissociation des microtubules pour un congrès chromosomique efficace, et RPS6KB1.

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• Au-delà de la mitose, NEK7 sert d'activateur critique de l'inflammasome NLRP3, débloquant NLRP3 au centre d'organisation des microtubules (MTOC) et permettant l'activation de CASP1 indépendamment de son activité kinase.

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• L'interaction de NEK7 avec NEK9 renforce l'exclusion mutuelle entre l'activation de l'inflammasome et la division cellulaire, agissant comme un interrupteur cellulaire.

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• Au niveau subcellulaire, NEK7 se localise dans le noyau, le cytoplasme, les pôles du fuseau, les centrosomes et le MTOC.

• Il est fortement exprimé dans le poumon, le muscle, le testicule, le cerveau, le cœur, le foie, les leucocytes et la rate, avec une expression plus faible dans l'ovaire, la prostate et le rein ; absent dans l'intestin grêle.

• Les caractéristiques structurelles et régulatrices clés incluent un domaine kinase de liaison à l'ATP, des sites de liaison aux métaux et des modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation et la phosphorylation.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène couvre une région conservée (aa 203-302) de NEK7 humain ; on s'attend à détecter la protéine endogène d'environ 35 kDa en WB avec des échantillons humains, de souris et de rat en raison de la forte homologie de séquence.
• Pour la WB, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux de lignées cellulaires couramment disponibles (par exemple, HeLa, HEK293T, Jurkat) comme témoins positifs et validez avec des échantillons knockdown ou knockout spécifiques pour confirmer l'identité de la bande.
• Pour l'ELISA, la protéine NEK7 recombinante ou le peptide peut être utilisé comme antigène de revêtement ; titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale dans votre système de test.
• Lors de l'étude des voies liées à l'inflammasome, incluez des traitements d'activation appropriés (par exemple, amorçage au LPS + nigéricine) pour évaluer le rôle de NEK7 ; notez que sa fonction dans l'activation de NLRP3 est indépendante de la kinase.
• Compte tenu de sa localisation nucléaire et cytoplasmique, fractionnement subcellulaire peut être employé pour enrichir des compartiments spécifiques avant la détection.

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