Anticorps polyclonal de lapin anti-NEDD8 pour WB et ELISA - Q15843

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NEDD8

• NEDD8 est une protéine de type ubiquitine (également appelée neddylin) qui présente une similarité structurale avec l’ubiquitine et constitue un composant clé de la voie de neddylation. Elle est codée chez l’humain par le gène NEDD8 (GeneID : 4738).
• NEDD8 joue un rôle essentiel dans le contrôle du cycle cellulaire et l’embryogenèse. La conjugaison de NEDD8 aux cullines (neddylation) est nécessaire au recrutement de l’enzyme E2 dans le complexe ubiquitine-ligase E3 de type culline-RING, facilitant la polyubiquitination puis la dégradation protéasomale des cyclines et d’autres protéines régulatrices.
  Références associées :
  PMID:10318914, PMID:10597293, PMID:11953428
• La neddylation du suppresseur de tumeur p53/TP53 inhibe son activité transcriptionnelle, établissant un lien entre NEDD8 et la régulation de p53.
  Références associées :
  PMID:15242646
• NEDD8 neddy­late également le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR), ce qui entraîne la stabilisation de la protéine et sa translocation vers la membrane cellulaire.
  Références associées :
  PMID:28891468
• La fixation covalente de NEDD8 à ses substrats nécessite une activation préalable par le complexe E1 UBE1C-APPBP1 et une liaison à l’enzyme E2 UBE2M.
  Références associées :
  PMID:14690597
• NEDD8 est principalement localisée dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation du cycle cellulaire et de la transcription.
• Elle est fortement exprimée dans le cœur, les muscles squelettiques, la rate, le thymus, la prostate, les testicules, les ovaires, le côlon et les leucocytes du sang périphérique.
• Les modifications post-traductionnelles de NEDD8 comprennent l’acétylation et la formation de liaisons isopeptidiques au cours de la neddylation. La protéine mature a un poids moléculaire d’environ 9 kDa.

Recommandations expérimentales et conseils techniques

• L’immunogène couvre la protéine NEDD8 entière (aa 1-81) ; l’anticorps devrait donc probablement détecter la forme mature de 9 kDa. En Western blot, envisagez d’utiliser des gels à pourcentage élevé (par exemple, SDS-PAGE à 15 %) ainsi que des marqueurs de faible poids moléculaire appropriés.
• L’anticorps est indiqué pour les applications WB et ELISA ; son adéquation à d’autres techniques telles que l’IHC ou l’IF peut nécessiter une validation expérimentale.
• Une réactivité croisée avec les protéines NEDD8 de souris et de rat est indiquée, mais il est recommandé de vérifier la réactivité dans votre système expérimental spécifique.
• Pour l’ELISA, envisagez d’utiliser l’anticorps à la fois pour la capture et la détection dans un format sandwich, mais il est conseillé d’optimiser les conditions de revêtement et de détection.
• Conservez l’anticorps conformément aux recommandations (expédié dans des sacs réfrigérants) et évitez les cycles répétés de congélation-décongélation afin de maintenir sa stabilité.

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